Anticorps polyclonal de lapin anti-NSP8 du SARS-CoV-2 pour WB, ELISA - P0DTC2

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la glycoprotéine Spike

• La glycoprotéine Spike (protéine S, également connue sous le nom d'E2, protéine Peplomère) est un antigène de surface majeur du SARS-CoV-2, essentiel pour l'entrée du virus dans les cellules hôtes. Elle existe sous forme d'homotrimère et est clivée en sous-unités S1 (liaison au récepteur) et S2 (fusion membranaire). Références associées : PMID:32142651 PMID:32155444 PMID:33607086

• La sous-unité S1 se fixe aux récepteurs de l'hôte, principalement l'enzyme de conversion de l'angiotensine 2 (ACE2), initiant l'infection. La liaison déclenche des changements conformationnels conduisant à la fusion membranaire, soit directement à la surface cellulaire, soit après endocytose. Références associées : PMID:34561887 PMID:32075877 PMID:32221306 PMID:34903715

• Des récepteurs alternatifs, tels que la neuropiline-1 (NRP1) et la NRP2, les intégrines ou l'ASGR1, peuvent médier l'entrée de manière indépendante de l'ACE2, expliquant potentiellement le tropisme viral dans les épithéliums olfactifs où l'expression de l'ACE2 est faible. Références associées : PMID:33082294 PMID:33082293 PMID:35150743 PMID:34837059

• Le clivage de la protéine S au site S2/S2' par des protéases de l'hôte, notamment la TMPRSS2 à la surface cellulaire ou la cathepsine L dans les endosomes, est essentiel pour amorcer la machinerie de fusion et libérer le génome viral dans le cytoplasme. Références associées : PMID:32142651 PMID:32703818 PMID:34159616

• En tant que protéine de fusion virale de classe I, la sous-unité S2 subit un changement conformationnel irréversible d'un état pré-fusion à une structure en épingle à cheveux post-fusion, médié par des régions de répétition heptadiques qui forment un trimère d'épingles à cheveux, entraînant la fusion membranaire. Références associées : PMID:34561887

• Les études structurales révèlent que le domaine de la tige de S contient des charnières flexibles, permettant une liberté d'orientation de la tête, ce qui peut faciliter l'engagement du récepteur et l'évasion immunitaire. Références associées : PMID:32817270

• La protéine Spike est localisée sur la membrane du virion, la membrane du compartiment intermédiaire réticulum endoplasmique-Golgi de l'hôte et la membrane de la cellule hôte. Elle subit des modifications post-traductionnelles étendues, notamment la glycosylation et la palmitoylation, et est un facteur de virulence clé.

• Les mots-clés fonctionnels clés incluent : attachement viral à la cellule hôte, fusion de la membrane virale avec la membrane hôte, protéine d'enveloppe virale, membrane de la cellule hôte, inhibition de la réponse immunitaire innée de l'hôte, superantigène et immunoevasion virale.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène est une protéine de fusion recombinante correspondant aux acides aminés 1-198 de la NSP8 du SARS-CoV-2 (YP_009742615.1). Pour le Western blot (WB), envisagez d'utiliser des contrôles positifs appropriés tels que des lysats de cellules infectées par le SARS-CoV-2 ou de la NSP8 recombinante. L'optimisation de la dilution de l'anticorps et des conditions de détection est recommandée.
• Pour l'ELISA, assurez un revêtement correct avec l'immunogène ou des peptides pertinents dérivés de la NSP8. Validez le test avec des contrôles sériques positifs et négatifs. La nature polyclonale peut permettre une détection sensible mais peut nécessiter un titrage minutieux pour minimiser le bruit de fond.
• Comme la réactivité croisée est confirmée pour le SARS-CoV-2, l'anticorps peut détecter la NSP8 des variants du SARS-CoV-2, mais des tests spécifiques sur les variants sont conseillés. Envisagez une cartographie des épitopes si une réactivité précise est nécessaire.

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