Anticorps polyclonal de lapin anti-SARS-CoV-2 NSP12 pour WB, ELISA - P0DTD1

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la NSP12 du SARS-CoV-2

• La NSP12 est l'ARN polymérase ARN-dépendante (RdRp) qui catalyse la transcription des ARN génomiques et sous-génomiques viraux, essentielle à la réplication du SARS-CoV-2. Références associées : PMID:32277040 PMID:32358203 PMID:32438371
• Avec les protéines accessoires nsp7 et nsp8, la NSP12 forme un complexe de réplication hautement processif nécessaire à une synthèse d'ARN efficace. Références associées : PMID:32277040 PMID:32358203 PMID:32438371
• Le domaine NiRAN de type kinase de la NSP12 attache un ou plusieurs nucléotides à l'extrémité N-terminale de la NSP9, créant une amorce ARN-protéine covalente pour l'initiation de la transcription. Références associées : PMID:37794589
• La NSP12 exécute une transcription discontinue en s'arrêtant aux séquences régulatrices de la transcription (TRS) et en sautant vers la TRS leader, conduisant à la production d'ARNm sous-génomiques. Références associées : PMID:35706445
• La NSP12 est une sous-unité de l'enzyme de coiffage de l'ARN viral et catalyse la réaction de guanylyltransférase formant la structure centrale du cap GpppA-ARN, cruciale pour la stabilité de l'ARNm et l'évasion immunitaire. Références associées : PMID:35944563
• Au niveau subcellulaire, la NSP12 se localise principalement dans le cytoplasme de l'hôte et est recrutée vers les vésicules à double membrane et les complexes de réplication périnucléaires dérivés du réticulum endoplasmique.
• En tant qu'acteur central de la réplication des coronavirus, la NSP12 est la cible de principaux médicaments antiviraux tels que le remdesivir et le molnupiravir.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le Western blot, notez que l'anticorps peut détecter à la fois le précurseur polyprotéique complet de la réplicase (~794 kDa) et la NSP12 mature après traitement protéolytique. Il est conseillé de valider la détection dans des lysats de cellules infectées par le SARS-CoV-2 ou des systèmes exprimant la NSP12 recombinante.
• Dans les applications ELISA, la nature polyclonale peut améliorer la sensibilité ; cependant, la réactivité croisée avec des protéines non apparentées ou d'autres coronavirus doit être exclue en utilisant des contrôles appropriés.
• L'immunogène étant un peptide synthétique (acides aminés 200–300 de la NSP12), confirmez que l'épitope reste accessible dans vos conditions de test (dénaturé vs natif).
• Pour la détection intracellulaire par immunofluorescence, considérez que la NSP12 est associée aux complexes de réplication virale sur les membranes de l'hôte ; la fixation/perméabilisation peut nécessiter une optimisation.

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