Anticorps polyclonal de lapin anti-SARS-CoV-2 NSP2 pour WB et ELISA - P0DTD1

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la NSP2 du SARS-CoV-2

• La NSP2 est une protéine non structurale clivée à partir de la polyprotéine réplicase 1ab (ORF1ab) du SARS-CoV-2, un grand précurseur multifonctionnel impliqué dans la transcription et la réplication virales.
• La NSP2 améliore la répression de l'ARNm hôte par le complexe 4EHP-GYF2, inhibant ainsi les réponses antivirales et facilitant la réplication virale. Cette activité se produit en coopération avec la NSP1, qui induit l'arrêt du ribosome sur les transcrits hôtes.
• La NSP2 se localise principalement dans le cytoplasme de l'hôte et est associée aux complexes de réplication virale qui se forment sur les vésicules à double membrane dérivées du réticulum endoplasmique.
• Contrairement à de nombreuses autres protéines non structurales, la NSP2 ne possède pas de domaines enzymatiques connus ; son rôle dans l'antagonisme immunitaire de l'hôte semble dépendre des interactions protéine-protéine, notamment par la modulation de la voie 4EHP-GYF2.
• La polyprotéine génère également d'autres enzymes critiques : la protéase papasine (nsp3) qui clive la NSP2 du précurseur, la protéase principale (nsp5) et l'ARN polymérase dépendante de l'ARN (nsp12).

Conseils expérimentaux et techniques

• L'anticorps a été obtenu contre un peptide synthétique couvrant les résidus 150–250 de la NSP2. En Western blot, on prédit que la protéine NSP2 mature migre à environ 71 kDa ; cependant, la polyprotéine réplicase pleine longueur (794 kDa) peut également être visible si le traitement est incomplet. Validez la ou les bandes détectées à l'aide de contrôles appropriés (par exemple, lysats de cellules infectées par le SARS-CoV-2 par rapport à un témoin simulé).
• Pour l'ELISA, envisagez d'utiliser comme coating la protéine NSP2 recombinante ou un lysat viral. Réalisez des expériences de titrage pour déterminer les dilutions de travail optimales.
• La réactivité croisée est confirmée contre le SARS-CoV-2 ; des tests contre d'autres coronavirus ou des homologues de NSP2 apparentés sont recommandés pour évaluer les effets hors cible.

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