Anticorps polyclonal de lapin contre la protéine Spike S1 du SARS-CoV-2 pour WB et ELISA - P59594

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la glycoprotéine Spike (S1)

• Identité de la protéine : La glycoprotéine Spike du SARS-CoV, également appelée E2 ou protéine peplomère, est une protéine de fusion virale de classe I de 139 kDa, essentielle à l'entrée du virus dans la cellule hôte.
• Fixation et entrée : La sous-unité S1 médie la fixation aux récepteurs de la cellule hôte (par exemple l'ACE2 humain et CLEC4M/DC-SIGNR), initiant l'infection puis l'internalisation du virus dans les endosomes.
• Fusion : Après l'endocytose, la protéolyse médiée par la cathepsine CTSL démasque le peptide de fusion dans S2, ce qui entraîne la fusion membranaire entre la capside virale et la membrane de la cellule hôte.
• Mécanisme de fusion : La protéine passe par au moins trois états conformationnels : natif pré-fusion, intermédiaire pré-épingle à cheveux et épingle à cheveux post-fusion ; les régions à bobines superenroulées forment une structure de trimère d'épingles à cheveux pour favoriser l'apposition des membranes.
• Peptide de fusion viral : Une courte région dans S2, exposée après clivage, s'insère directement dans la membrane hôte pour promouvoir la fusion.
• Échappement immunitaire : Il diminue l'expression de la tetherine (BST2) de l'hôte par dégradation lysosomiale pour contrecarrer l'activité antivirale.
• Localisation subcellulaire : Présent sur la membrane de la capside virale, la membrane du compartiment intermédiaire entre le réticulum endoplasmique et l'appareil de Golgi de l'hôte et la membrane de la cellule hôte ; classé comme protéine d'enveloppe virale et protéine à hélice transmembranaire.
• Modifications clés : Glycoprotéine avec des ponts disulfures, palmitoylation (lipoprotéine) et un peptide signal ; les caractéristiques structurelles incluent des domaines à bobines superenroulées essentiels à la fusion.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique couvrant les acides aminés 1 à 100 de l'extrémité N-terminale de la sous-unité S1 ; la population d'anticorps obtenue peut reconnaître les épitopes linéaires dans cette région, y compris les sites potentiels de glycosylation.
• Pour le Western blot, envisagez d'utiliser des conditions réductrices et non réductrices pour évaluer l'impact des ponts disulfures sur la disponibilité des épitopes, et validez avec des lysats de cellules infectées par le SARS-CoV ou la protéine Spike recombinante.
• Pour les applications ELISA, la nature polyclonale offre une avidité élevée ; testez à la fois les formats direct et de capture, et incluez des antigènes de contrôle appropriés (par exemple S1 recombinante, trimère de S) pour confirmer la spécificité.
• La réaction croisée rapportée avec le SARS-CoV suggère une reconnaissance potentiellement large parmi les coronavirus apparentés ; une validation supplémentaire avec les variants de la protéine Spike du SARS-CoV-2 peut être nécessaire.

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