Anticorps polyclonal de lapin anti-NSP7 du SARS-CoV-2 pour WB, ELISA - P0DTC2

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la glycoprotéine Spike (S)

• La glycoprotéine Spike (S), également connue sous le nom de protéine E2 ou peplomère, est codée par le gène S du SARS-CoV-2 et médie l'entrée virale dans les cellules hôtes.
• La protéine S attache le virion à la membrane de la cellule hôte en interagissant principalement avec le récepteur ACE2 (PubMed:32142651, PubMed:32155444, PubMed:33607086). Références connexes : PMID:32142651 PMID:32155444 PMID:33607086
• L'entrée virale peut également se faire via des récepteurs alternatifs, notamment NRP1/NRP2 (PubMed:33082294, PubMed:33082293) et les intégrines (PubMed:35150743), ce qui peut contribuer au tropisme pour les cellules de l'épithélium olfactif. Références connexes : PMID:33082294 PMID:33082293 PMID:35150743
• Après la liaison au récepteur, la protéine S subit un clivage protéolytique par la TMPRSS2 de l'hôte ou la cathepsine L pour déclencher la fusion membranaire, agissant comme une protéine de fusion virale de classe I (PubMed:32142651, PubMed:32703818, PubMed:34159616, PubMed:34561887). Références connexes : PMID:32142651 PMID:32703818 PMID:34159616 PMID:34561887
• Le précurseur Spike est traité en sous-unités S1 et S2 ; la sous-unité S2 contient des peptides de fusion et des répétitions héptadiques qui se replient pour favoriser la fusion entre l'enveloppe virale et la membrane de l'hôte.
• Au niveau subcellulaire, la protéine Spike se localise à la membrane du virion, au compartiment intermédiaire entre le réticulum endoplasmique et l'appareil de Golgi de l'hôte, ainsi qu'à la membrane cellulaire de l'hôte.
• Le domaine de tige de S contient trois charnières flexibles, conférant une liberté d'orientation considérable à la tête de liaison au récepteur (PubMed:32817270). Références connexes : PMID:32817270

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un fragment de protéine NSP7 recombinante ; pour le Western blot, envisagez de valider la détection de la NSP7 endogène dans des lysats cellulaires infectés par le SARS-CoV-2 ou d'utiliser la NSP7 recombinante comme témoin positif.
• En tant qu'anticorps polyclonal, des variations d'un lot à l'autre peuvent se produire ; incluez des témoins négatifs appropriés et optimisez les facteurs de dilution pour chaque nouveau lot.
• Pour l'ELISA, le couplage avec un anticorps de détection NSP7 validé ou un antigène peut améliorer la sensibilité du test ; effectuez des titrations en damier pour déterminer les concentrations optimales.
• Notez que le poids moléculaire prédit de la NSP7 est d'environ 9,6 kDa ; si des bandes inattendues sont observées, évaluez la préparation des échantillons et la spécificité de l'anticorps.

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