Anticorps polyclonal de lapin anti-REST/NRSF pour WB, ELISA - Q13127

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de REST/NRSF

• Agit comme un répresseur transcriptionnel qui se lie à l'élément silencieur neurone-restreint (NRSE) et recrute les corépresseurs SIN3A et RCOR1, entraînant le recrutement d'histones déacétylases et la répression des gènes neuronaux dans les cellules non neuronales. Références associées : PMID:11741002, PMID:11779185, PMID:12399542, PMID:10449787, PMID:10734093

• Médie la modification de la chromatine via le complexe BHC, qui déacétyle et déméthyle les histones au niveau des sites RE1/NRSE pour maintenir la répression génique.

• Répresse la transcription par le recrutement dépendant de CDYL de l'histone méthyltransférase EHMT2, un mécanisme qui pourrait supprimer la transformation cellulaire. Références associées : PMID:19061646

• L'activité répresseur est antagonisée par l'hétérodimérisation avec l'isoforme 3 épissée alternativement, qui empêche la liaison au NRSE et déréprime les gènes cibles. Références associées : PMID:11779185

• Maintient l'état quiescent des cellules souches neurales adultes en réprimant les gènes neuronaux ; la dissociation du NRSE après les signaux de différenciation permet la spécification neuronale. Références associées : PMID:21258371

• Agit comme un répresseur clé de l'expression génique en conditions hypoxiques et contribue à la résistance au stress et à la régulation de la mort cellulaire dans le cerveau vieillissant. Références associées : PMID:27531581, PMID:24670762

• Expression tissulaire : détecté dans les neurones du cortex préfrontal, de l'hippocampe et du cervelet ; les niveaux nucléaires sont réduits dans la maladie d'Alzheimer et la maladie de Parkinson, avec une agrégation pathologique dans les corps de Lewy des neurones dopaminergiques. Références associées : PMID:24670762, PMID:30684677

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 25 à 130 de la protéine REST humaine, une région N-terminale située avant les domaines à doigts de zinc. Les utilisateurs doivent vérifier que leur système expérimental préserve cet épitope.
• Pour le Western blot, commencez par une dilution de 1:500 à 1:2000 et validez en utilisant des lysats de lignées cellulaires non neuronales exprimant REST (par exemple HeLa) avec des contrôles appropriés.
• Pour l'ELISA, la protéine REST recombinante ou un peptide couvrant la région de l'immunogène peut servir de contrôle positif pour évaluer la liaison de l'anticorps.
• Bien qu'une réactivité croisée avec la souris et le rat soit rapportée, un alignement de séquence interespèces sur la région de l'immunogène est recommandé pour confirmer la réactivité attendue.
• En raison du poids moléculaire élevé (~ 122 kDa), assurez-vous que les conditions d'électrophorèse sur gel sont optimisées pour les protéines de haut poids moléculaire, et envisagez des temps de transfert prolongés pour le WB.

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