Anticorps polyclonal de lapin contre NSP10 du SRAS-CoV-2 pour WB, IP, ELISA - P0DTD1

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de NSP10

• NSP10 est une protéine non structurale codée par le gène de la réplicase (rep) du SRAS-CoV-2, faisant partie de la polyprotéine ORF1ab (polyprotéine de réplicase 1ab, P0DTD1). Elle est libérée par clivage protéolytique de la polyprotéine.
• NSP10 joue un rôle central dans la transcription virale en stimulant à la fois les activités 3'-5' exoribonucléase (relecture) de nsp14 et 2'-O-méthyltransférase de nsp16, garantissant ainsi une méthylation correcte de la coiffe de l'ARNm viral.
  Références associées : PMID:35944563
• NSP10 se localise principalement dans le cytoplasme de l'hôte et la région périnucléaire, où elle interagit avec d'autres protéines non structurales pour former le complexe de réplication-transcription (RTC).
• En tant que cofacteur essentiel, NSP10 est indispensable au coiffage de l'ARN viral, ce qui aide le virus à échapper aux capteurs immunitaires innés de l'hôte tels que IFIT1 et IFIT3.
• La protéine est fortement conservée chez les coronavirus, ce qui en fait une cible potentielle pour les traitements antiviraux et un antigène pertinent pour le développement d'anticorps.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène utilisé pour cet anticorps est une protéine recombinante couvrant les acides aminés 1–139 de NSP10 du SRAS-CoV-2 (YP_009725306.1). Cette construction de pleine longueur devrait générer des anticorps reconnaissant de multiples épitopes, offrant une détection robuste dans les essais.
• Les anticorps polyclonaux peuvent présenter une légère variabilité d'un lot à l'autre ; il est recommandé de titrer et de valider l'anticorps dans votre système expérimental spécifique (par exemple, lysats de cellules infectées pour WB, IP ou ELISA).
• Pour le Western blot, utilisez des contrôles positifs appropriés tels que des lysats de cellules infectées par le SRAS-CoV-2 ou de la NSP10 surexprimée. Notez que NSP10 migre à environ 14 kDa, tandis que la valeur de 794 kDa indiquée correspond à la polyprotéine de réplicase entière.
• En immunoprécipitation, l'anticorps peut co-immunoprécipiter des partenaires d'interaction comme nsp14 et nsp16 ; validez attentivement les conditions de co-IP.
• Pour l'ELISA, utilisez la protéine NSP10 recombinante comme étalon pour évaluer la sensibilité et la spécificité de l'anticorps avant de tester des échantillons cliniques.

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