Anticorps polyclonal anti-NSP3 du SARS-CoV-2 pour WB et ELISA - P0DTD1

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de la NSP3 du SARS-CoV-2

• La NSP3 du SARS-CoV-2 est un composant de la polyprotéine de réplicase 1ab (également appelée polyprotéine ORF1ab), qui est clivée par sa propre activité de protéase de type papaïne afin de libérer la protéine NSP3.
• La NSP3 possède une activité de protéase de type papaïne (PL-PRO) responsable des clivages à l’extrémité N-terminale de la polyprotéine, et collabore avec la NSP4 pour assembler des vésicules à double membrane (DMV) nécessaires à la réplication virale (PubMed:35551511). Références associées : PMID:35551511
• Elle antagonise l’induction de l’interféron de type I par l’immunité innée en bloquant la phosphorylation, la dimérisation et la translocation nucléaire de l’IRF3 de l’hôte (PubMed:32733001), et empêche la signalisation de NF-kappa-B (par similarité).
Références associées : PMID:32733001
• La NSP3 agit comme une enzyme de déubiquitination et de désISGylation, traitant les chaînes de polyubiquitine liées par Lys-48 et Lys-63, et retirant préférentiellement l’ISG15 de IFIH1/MDA5 (PubMed:32726803, PubMed:33727702).
Références associées : PMID:32726803, PMID:33727702
• La protéine présente une activité d’hydrolase de l’ADP-ribose, éliminant la mono-ADP-ribose des protéines de l’hôte et interférant probablement avec les défenses immunitaires de l’hôte médiées par les PARP (probable) (PubMed:37242344).
Références associées : PMID:37242344
• La localisation subcellulaire comprend le cytoplasme de l’hôte, la membrane du réticulum endoplasmique et les vésicules à double membrane, ce qui concorde avec son rôle dans la formation des organites de réplication.
• Les mots-clés comprennent l’immunoévasion virale, l’inhibition de la réponse immunitaire innée de l’hôte et l’activité de déubiquitinase, soulignant son rôle multifonctionnel dans l’interaction hôte-virus.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène correspond aux acides aminés 1 à 200 de la NSP3 (YP_009725299.1), une région située dans le domaine N-terminal ; il peut ainsi permettre de détecter des épitopes essentiels à ses fonctions de protéase ou de liaison à l’ADP-ribose.
• Pour le Western blot (WB), envisagez d’utiliser des lysats cellulaires totaux provenant de cellules infectées par le SARS-CoV-2, mais validez la bande attendue (environ 794 kDa pour la polyprotéine complète ou le fragment NSP3 clivé) dans votre système spécifique.
• Les applications ELISA peuvent être développées en utilisant cet anticorps polyclonal comme réactif de capture ou de détection ; l’association avec un anticorps monoclonal peut améliorer la spécificité.
• La réactivité croisée a été confirmée avec le SARS-CoV-2 ; des tests avec d’autres coronavirus sont recommandés si nécessaire.

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