Anticorps polyclonal anti-domaine RBD de la protéine Spike du SARS-CoV pour WB et ELISA - P59594

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation du RBD de la protéine Spike du SARS-CoV

• La glycoprotéine Spike du SARS-CoV (également appelée E2 ou protéine Peplomer) est codée par le gène S et est essentielle à l’entrée du virus dans les cellules hôtes.
• Elle assure l’attachement viral en se liant aux récepteurs de l’hôte, l’enzyme de conversion de l’angiotensine 2 (ACE2) et CLEC4M/DC-SIGNR, ce qui déclenche l’internalisation du virion dans les endosomes.
• Après la liaison au récepteur et l’activation protéolytique par les cathepsines de l’hôte, la protéine Spike agit comme une protéine de fusion virale de classe I, favorisant la fusion entre les membranes virale et cellulaire de l’hôte.
• Le domaine de liaison au récepteur (RBD), situé dans la sous-unité S1, est directement responsable de l’interaction avec ACE2 et constitue une cible majeure des anticorps neutralisants.
• La protéine présente également des fonctions immunomodulatrices, telles que la diminution de la tetherine de l’hôte (BST2) par dégradation lysosomale afin de contrer les réponses immunitaires innées antivirales.
• Au niveau subcellulaire, la glycoprotéine Spike se localise sur la membrane du virion, la membrane du compartiment intermédiaire réticulum endoplasmique-appareil de Golgi (ERGIC) de l’hôte et la membrane des cellules hôtes.
• Elle subit d’importantes modifications post-traductionnelles, notamment une glycosylation, la formation de ponts disulfure et une palmitoylation, qui sont essentielles à sa structure et à sa fonction.
• Mots-clés supplémentaires : immunoévasion virale, inhibition de la réponse immunitaire innée de l’hôte et facteur de virulence.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène utilisé pour produire cet anticorps est un peptide synthétique couvrant les acides aminés 350 à 450 du RBD de Spike (sur la base de l’accession NP_828851.1) ; il convient de tenir compte de cette région épitopique lors de la conception des tests de détection.
• Cet anticorps polyclonal convient aux applications de Western blot (WB) et d’ELISA ; les utilisateurs doivent optimiser les facteurs de dilution et valider les performances dans leurs matrices d’échantillons spécifiques.
• Compte tenu de la réactivité croisée signalée avec le SARS-CoV, l’anticorps peut également reconnaître les protéines Spike de souches étroitement apparentées, mais sa réactivité avec d’autres coronavirus doit être évaluée expérimentalement.
• Pour la détection par WB, le poids moléculaire prédit de la glycoprotéine Spike entière est d’environ 139 kDa, mais des produits de clivage ou des bandes de dégradation peuvent être observés selon la préparation de l’échantillon.
• En ELISA, l’association de cet anticorps avec un anticorps de capture approprié ou une stratégie de revêtement antigénique ciblant le RBD peut améliorer la sensibilité du test ; il est recommandé d’envisager des titrages préliminaires en damier.

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