Anticorps polyclonal de lapin anti-NSP16 du SARS-CoV-2 pour WB, ELISA - P0DTD1

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la NSP16

• La NSP16 est le domaine 2'-O-méthyltransférase de la polyprotéine réplicase 1ab du SARS-CoV-2, responsable de la méthylation de la structure coiffe 5' des ARNm viraux. Références associées : PMID:35944563
• L'activité de méthylation est cruciale pour l'évasion immunitaire : elle permet aux ARNm viraux d'échapper à la reconnaissance par les facteurs de restriction hôtes IFIT1 et IFIT3. Références associées : PMID:35944563 PMID:36722972 PMID:36285486
• La NSP16 nécessite une coiffe N7-méthylguanosine sur le substrat d'ARNm pour exercer sa liaison et son activité enzymatique. Références associées : PMID:35944563
• Elle peut également interférer avec l'épissage des ARNm hôtes en interagissant avec les domaines de reconnaissance des pré-ARNm des snRNA U1 et U2 dans le noyau. Références associées : PMID:33080218
• La localisation sous-cellulaire comprend le cytoplasme hôte, la région périnucléaire et le noyau, ce qui est cohérent avec ses rôles dans la réplication virale et la manipulation de l'hôte.
• En tant que composant du complexe de réplication-transcription virale, la NSP16 est essentielle à la production d'ARNm viraux matures capables d'être traduits.
• La polyprotéine est clivée par les protéases virales en 16 protéines non structurelles ; la NSP16 constitue le domaine C-terminal.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 236 à 290 de la NSP16, une région susceptible d'être exposée dans des conditions dénaturantes, ce qui confirme son utilisation en Western blot.
• Validez l'anticorps sur des lysats de cellules infectées par le SARS-CoV-2 ou sur la protéine NSP16 recombinante pour confirmer sa spécificité.
• Pour l'ELISA, envisagez l'association avec un anticorps de capture ou de détection approprié ; réalisez une titration pour optimiser les rapports signal/bruit.
• Étant donné que le poids moléculaire prédit de la NSP16 est d'environ 33 kDa, confirmez la taille de la bande observée dans vos conditions expérimentales, en gardant à l'esprit les possibles modifications post-traductionnelles ou intermédiaires de traitement.
• Incluez des contrôles positifs et négatifs appropriés pour distinguer le signal spécifique du bruit de fond.

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