Anticorps polyclonal de lapin anti-NSP4 du SARS-CoV-2 pour WB, IP, ELISA - P0DTD1

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la NSP4

• La protéine non structurelle 4 (NSP4) du SARS-CoV-2 est une composante de la polyprotéine réplicase 1ab (pp1ab) codée par le gène ORF1ab.
• La NSP4 est essentielle pour la formation des vésicules à double membrane (DMV), les organites de réplication virale, en conjonction avec la NSP3.
  Références connexes : PMID:35551511
• Les DMV fournissent un microenvironnement protecteur pour la synthèse de l'ARN viral, le protégeant des capteurs immunitaires innés de l'hôte.
• La NSP4 se localise à la membrane du réticulum endoplasmique (RE) de l'hôte, où elle induit la courbure membranaire et la vésiculation.
• C'est une protéine transmembranaire à plusieurs passages, s'intégrant dans la membrane du RE via plusieurs régions hydrophobes.
• La fonction de la NSP4 est conservée parmi les coronavirus, soulignant son importance dans le cycle de réplication virale.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre la région C-terminale (aa 400-500) de la NSP4, prédite pour être du côté cytoplasmique de la membrane du RE ; cette conception peut faciliter la détection de la protéine dénaturée et native dans des applications telles que WB et IP.
• Pour le Western blot, notez que la protéine NSP4 mature migre à environ 56 kDa, tandis que la polyprotéine pp1ab pleine longueur est d'environ 794 kDa ; optimisez le pourcentage de gel et les conditions de transfert en conséquence.
• Dans ELISA, envisagez de revêtir avec la protéine NSP4 recombinante ou d'associer cet anticorps à un anticorps de détection approprié pour les dosages sandwich ; une validation sur des lysats de cellules infectées par le SARS-CoV-2 est recommandée.
• Puisque l'anticorps présente une réactivité croisée avec le SARS-CoV-2, il convient à l'étude de ce coronavirus spécifique ; testez la réactivité croisée avec d'autres coronavirus si des applications plus larges sont requises.

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