Anticorps polyclonal de lapin anti-Histone H4-R3 DiMéthyl-Asymétrique | P62805 | Validé pour WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'histone H4

L'histone H4 est un composant central du nucléosome, autour duquel l'ADN s'enroule pour former la chromatine. Cette structure fondamentale compacter l'ADN génomique et régule son accessibilité aux enzymes et autres facteurs nécessaires aux processus dépendants de l'ADN, tels que la transcription, la réplication et la réparation. Les histones, y compris H4, sont donc essentielles au maintien de la stabilité chromosomique et du contrôle épigénétique.

Un ensemble complexe de modifications post-traductionnelles, souvent appelé le code des histones, régule la dynamique de la chromatine. L'histone H4 subit de nombreuses modifications, notamment l'acétylation, la méthylation, la phosphorylation et la citrullination, à divers résidus le long de sa queue N-terminale et de son domaine globulaire.

Cet anticorps cible spécifiquement la diméthylation asymétrique de l'arginine 3 (R3) dans la queue N-terminale de l'histone H4. Dans la protéine traitée, cela correspond au résidu 4 (R4). Cette modification est catalysée principalement par la protéine arginine méthyltransférase 1 (PRMT1) et joue un rôle dans l'activation transcriptionnelle et le remodelage de la chromatine.

Références connexes : PMID:11387442, PMID:11448779, PMID:15345777

L'histone H4 est localisée dans le noyau et sur les chromosomes. Au cours de la spermatogenèse, l'acétylation de H4 est associée à sa localisation nucléaire dans les spermatides à l'étape 11.

Références connexes : UniProtKB P62805

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène utilisé pour cet anticorps est un peptide synthétique portant une diméthylation asymétrique en R3, garantissant une haute spécificité pour la forme méthylée de l'histone H4. Envisagez de valider la spécificité en comparant les signaux issus d'essais de compétition avec des peptides méthylés par rapport à des peptides non méthylés.
• Pour le Western blot (WB), des protocoles d'extraction d'histones enrichissant en protéines nucléaires ou liées à la chromatine sont recommandés. Le poids moléculaire prédit de l'histone H4 est d'environ 11 kDa, bien qu'elle puisse migrer légèrement plus haut ou sous forme de bande selon l'étendue des autres modifications et les conditions du gel.
• Dans les techniques d'immunofluorescence (IF/ICC) et d'immunohistochimie (IHC-P), attendez-vous à un marquage nucléaire. Les conditions de perméabilisation et de fixation peuvent nécessiter une optimisation pour préserver la reconnaissance de l'épitope tout en exposant le compartiment nucléaire.
• Lors de l'utilisation de cet anticorps en ELISA, envisagez de revêtir avec du peptide méthylé ou des extraits d'histones pour dépister l'activité de liaison. Incluez toujours des témoins appropriés pour écarter toute liaison non spécifique.
• Il a été rapporté que cet anticorps détecte H4 chez l'humain, la souris et le rat, avec une large gamme d'autres espèces prédite. La réactivité croisée doit être vérifiée dans le système d'échantillon pertinent si l'on travaille avec des modèles non mammifères.

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