pAb Lapin anti-Histone H3-R26 Diméthylée Symétrique (Q16695/P68431) pour WB, IF/ICC, ELISA

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de l'Histone H3

L'histone H3 est un composant central du nucléosome, l'unité répétitive fondamentale de la chromatine. Les nucléosomes enroulent et compactent l'ADN, limitant l'accès au matériel génétique et régulant ainsi des processus essentiels tels que la transcription, la réparation de l'ADN, la réplication de l'ADN et la stabilité chromosomique. La régulation dynamique de l'accessibilité de l'ADN est obtenue grâce à un ensemble complexe de modifications post-traductionnelles (MPT) sur les histones, souvent appelé "code histone", ainsi qu'au remodelage des nucléosomes. Références associées : UniProt Q16695, UniProt P68431

L'histone H3 se localise principalement dans le noyau et est associée aux chromosomes. Elle est exprimée sous diverses isoformes ; par exemple, la variante H3.1t (codée par H3-4) présente une expression spécifique des testicules, tandis que l'histone H3.1 canonique est ubiquitaire dans les cellules somatiques. Références associées : UniProt Q16695, UniProt P68431

La queue N-terminale de l'histone H3 est sujette à de nombreuses MPT, incluant l'acétylation, la méthylation (lysine et arginine), la phosphorylation, la citrullination, et d'autres. Les états de méthylation spécifiques (par exemple, diméthylarginine symétrique/asymétrique, mono-, di- ou triméthyllysine) à des résidus définis servent de sites d'amarrage pour des protéines effectrices, influençant la structure de la chromatine et l'expression des gènes. La méthylation de l'arginine, telle que la diméthylation symétrique médiée par PRMT5, est impliquée dans la régulation transcriptionnelle et l'organisation du génome. Références associées : PMID:17898714, PMID:18077460, PMID:19608861

La forte conservation évolutive de l'histone H3 à travers les espèces sous-tend la large réactivité croisée des anticorps produits contre des séquences humaines, ce qui en fait des outils précieux pour étudier la biologie de la chromatine dans de multiples organismes modèles. Références associées : UniProt Q16695, UniProt P68431

Guide Expérimental et Conseils Techniques

• Cet anticorps a été généré en utilisant un peptide synthétique diméthylé symétrique englobant l'arginine 26 (R26) de l'histone H3 humaine. Il est censé reconnaître spécifiquement la marque de diméthylation symétrique à cette position.
• Pour le Western blot (WB), une bande d'environ 15 kDa est typiquement observée. Envisagez d'utiliser des extraits nucléaires ou des histones extraites à l'acide pour enrichir la cible.
• En immunofluorescence/immunocytochimie (IF/ICC), assurez-vous d'utiliser des protocoles de fixation et de perméabilisation appropriés pour permettre l'accès de l'anticorps à la chromatine nucléaire. Un contrôle positif avec des états de modification H3R26me2s connus peut aider à l'interprétation.
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut être utilisé pour une détection directe ou dans un format sandwich. Validez le test avec le peptide immunogène et des contrôles appropriés.
• Étant donné que l'immunogène est un peptide, la pré-adsorption avec le peptide non méthylé ou diméthylé asymétrique peut aider à confirmer la spécificité, bien que cela doive être validé dans le système d'échantillon pertinent.
• La réactivité croisée largement prédite suggère une utilité pour l'humain, la souris, le rat et potentiellement d'autres espèces ; cependant, il est conseillé de vérifier les performances dans l'espèce d'intérêt spécifique.

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