Anticorps polyclonal de lapin Asymétrique DiMéthyl-Histone H4-R3 (P62805) pour WB, IHC-P, ELISA

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'histone H4

L'histone H4 est un composant central du nucléosome, l'unité fondamentale de la chromatine. Avec les histones H2A, H2B et H3, elle forme un octamère autour duquel l'ADN s'enroule, compactant le génome et régulant l'accès au matériel génétique. Ce rôle structurel est essentiel pour la régulation de la transcription, la réparation de l'ADN, la réplication de l'ADN et la stabilité chromosomique. Les fonctions des histones sont hautement régulées par un ensemble complexe de modifications post-traductionnelles (MPT), collectivement appelées le « code histone », qui modifient la dynamique de la chromatine et les interactions protéiques.

La diméthylation asymétrique de l'histone H4 sur l'arginine 3 (H4R3me2a) est une MPT spécifique catalysée par la protéine arginine méthyltransférase 1 (PRMT1). Cette modification se produit sur la queue N-terminale flexible de H4 et a été impliquée dans l'activation transcriptionnelle et la régulation épigénétique. La modification crée un site de liaison pour les protéines effectrices qui interprètent la marque de méthylation, influençant ainsi les profils d'expression génique.

Références associées : PMID:11387442, PMID:11448779, PMID:15345777

L'histone H4 est majoritairement localisée dans le noyau et associée aux chromosomes tout au long du cycle cellulaire. Sa séquence hautement conservée chez tous les eucaryotes souligne son importance biologique fondamentale. Outre la diméthylation asymétrique, la queue N-terminale de H4 subit de nombreuses autres modifications, notamment l'acétylation, la phosphorylation et la diméthylation symétrique, qui orchestrent collectivement la fonction de la chromatine.

Cet anticorps reconnaît spécifiquement la marque de diméthylation asymétrique au niveau du R3, permettant une étude détaillée de cette modification épigénétique dans divers contextes biologiques.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique porteur de la modification asymétrique diméthyl-R3. Pour confirmer la spécificité de l'anticorps, il est recommandé de réaliser des essais de compétition par peptide en utilisant à la fois des peptides méthylés et non méthylés.
• Pour le Western blotting, un protocole standard d'extraction d'histones est recommandé pour enrichir les protéines liées à la chromatine. Le poids moléculaire prédit de l'histone H4 est d'environ 11 kDa. Utilisez une SDS-PAGE dans des conditions appropriées (par exemple, gel à 15 %) pour une résolution optimale des histones de faible poids moléculaire.
• En immunohistochimie (paraffine), un démasquage antigénique peut être nécessaire. Optimisez la méthode de démasquage et la dilution de l'anticorps en utilisant des contrôles tissulaires positifs et négatifs appropriés.
• Cet anticorps est prédit pour avoir une réactivité croisée avec l'homme, la souris, le rat et d'autres espèces. Cependant, la réactivité croisée dans votre système expérimental spécifique doit être vérifiée à l'aide des contrôles disponibles.
• Comme pour tout anticorps polyclonal, la cohérence entre lots doit être évaluée pour les essais quantitatifs critiques. Envisagez d'inclure un contrôle de chargement tel que l'histone H4 totale ou une protéine domestique.

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