Anticorps Polyclonal de Lapin anti-Histone H3 DiMéthylé Asymétrique (R17) – Q16695/P68431 | WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de l'Histone H3

L'Histone H3 est un composant central du nucléosome, qui enroule et compresse l'ADN en chromatine. Cet emballage limite l'accessibilité de l'ADN aux machineries cellulaires nécessaires pour des processus tels que la transcription, la réparation de l'ADN, la réplication de l'ADN et la stabilité chromosomique. Les histones jouent donc un rôle central dans la régulation de l'expression des gènes et de l'intégrité du génome. Références connexes : UniProtKB Q16695 / P68431

La fonction des histones est fortement régulée par un ensemble diversifié de modifications post-traductionnelles (PTM), souvent appelées le « code des histones ». Ces PTM incluent l'acétylation, la méthylation, la phosphorylation et l'ubiquitination, entre autres, et elles orchestrent le remodelage des nucléosomes et le recrutement de protéines effectrices. Parmi ces modifications, la méthylation de l'arginine — en particulier la diméthylation asymétrique — est une marque épigénétique clé associée à l'activation et à la répression transcriptionnelles.

L'Histone H3 existe sous plusieurs isoformes. L'isoforme H3.1 dépendante de la réplication (P68431) est largement exprimée dans les tissus, tandis que H3.1t (Q16695) est spécifiquement exprimée dans les cellules testiculaires, suggérant des rôles spécialisés dans la spermatogenèse. Les deux isoformes se localisent dans le noyau et sur les chromosomes.

La diméthylation asymétrique de l'histone H3 à l'arginine 17 (R17 ; position 18 dans la séquence précurseur incluant la méthionine initiatrice) est catalysée par la protéine arginine méthyltransférase CARM1 (PRMT4). Cette modification a été impliquée dans la régulation transcriptionnelle et est un marqueur bien étudié des états de chromatine active. Références connexes : PMID:15345777, PMID:15471871, PMID:16497732

Cet anticorps reconnaît spécifiquement l'histone H3 lorsqu'elle est diméthylée de manière asymétrique au R17. Il ne détecte pas la H3 non modifiée ni d'autres états de méthylation tels que la diméthylation symétrique ou la monométhylation de l'arginine à ce site, ce qui en fait un outil précieux pour étudier la signalisation médiée par CARM1 et la régulation épigénétique.

Guidance Expérimentale et Conseils Techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique conçu autour de la diméthylarginine asymétrique au R17 de l'histone H3 humaine. Lors de la réalisation de western blotting (WB) ou d'immunohistochimie (IHC-P), envisagez d'utiliser des lysats cellulaires ou tissulaires connus pour exprimer cette modification (par exemple, des cellules HeLa ou des testicules de souris) comme témoins positifs.
• Comme cet anticorps est prédit pour avoir une large réactivité croisée au-delà de l'humain, de la souris et du rat, il peut convenir pour détecter la modification chez d'autres espèces. Cependant, une validation dans le système d'échantillon pertinent est recommandée.
• Pour ELISA, assurez-vous que l'antigène de revêtement contient l'épitope diméthyl-R17 asymétrique, car l'anticorps ne reconnaîtra pas les peptides non modifiés ou méthylés différemment.
• Puisque l'anticorps est polyclonal, la variabilité d'un lot à l'autre est un facteur à considérer ; incluez des témoins négatifs appropriés (par exemple, peptide H3 non modifié) pour confirmer la spécificité.

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