Anticorps monoclonal de lapin contre DiMéthyl-Histone H3-K36 (Q16695/P68431) pour WB, IHC, IP et ELISA

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'Histone H3

• Composant central du nucléosome : L'Histone H3 est essentielle pour l'enroulement et la compaction de l'ADN en chromatine, ce qui restreint l'accès à l'ADN pour la transcription, la réparation et la réplication. Ce rôle central influence la régulation transcriptionnelle, la réparation de l'ADN, la réplication de l'ADN et la stabilité chromosomique.
  Références associées : UniProt Q16695, UniProt P68431
• Localisation subcellulaire : L'Histone H3 est localisée dans le noyau et constitue un composant structurel des chromosomes, formant la particule centrale du nucléosome.
  Références associées : UniProt Q16695, UniProt P68431
• Spécificité tissulaire : L'Histone H3.1 canonique (P68431) est exprimée de manière ubiquitaire, tandis que le variant Histone H3.1t (Q16695) est spécifique des testicules.
  Références associées : UniProt Q16695, UniProt P68431
• Modifications post-traductionnelles (MPT) : L'Histone H3 subit de nombreuses MPT, notamment la méthylation, l'acétylation, la phosphorylation, la citrullination et l'ubiquitination. Ces modifications forment le « code histone » qui régule la structure de la chromatine et l'expression génique. La diméthylation au niveau de la lysine 36 (H3K36me2, correspondant à la position 37 sur UniProt) est associée à l'élongation transcriptionnelle et est catalysée par des méthyltransférases comme NSD1.
  Références associées : PMID:15983376

Conseils expérimentaux et techniques

• Pour le Western blotting (WB), une bande d'environ 15 kDa est attendue. Envisagez d'utiliser des lysats enrichis en fraction nucléaire pour une détection optimale et validez le protocole de lyse adapté à votre type d'échantillon.
• En immunohistochimie (IHC-P), testez les conditions de démasquage antigénique (par exemple, tampon citrate pH 6,0 ou EDTA pH 9,0) et optimisez la dilution de l'anticorps pour votre tissu et votre méthode de fixation.
• Pour les applications de dot blot (DB) et d'ELISA, l'anticorps peut être utilisé pour détecter ou quantifier les peptides H3K36 diméthylés ; incluez des contrôles peptidiques appropriés (peptides non modifiés et peptides d'autres états de méthylation) pour vérifier la spécificité.
• Lors de l'utilisation en immunofluorescence (IF/ICC), les conditions de perméabilisation et la fixation peuvent affecter l'accessibilité de l'épitope ; envisagez de tester la fixation au méthanol par rapport à la fixation au formaldéhyde.
• En immunoprécipitation (IP), utilisez des conditions de réticulation ou natives en fonction du complexe cible ; validez la stringence des lavages pour préserver l'interaction anticorps-antigène.
• Une réaction croisée avec un large éventail d'espèces est prédite pour cet anticorps ; il est recommandé de confirmer la spécificité dans votre système expérimental, en particulier pour les échantillons non mammaliens.

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