Anticorps polyclonal de lapin anti-DiMethyl-Histone H3-K9 (Q16695/P68431) pour la recherche en épigénétique | WB, ChIP, IF/ICC

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'Histone H3

L'histone H3 est un composant central du nucléosome, qui enveloppe et compacte l'ADN en chromatine, régulant ainsi l'accessibilité de l'ADN pour des processus tels que la transcription, la réparation de l'ADN, la réplication et la stabilité chromosomique. La modification post-traductionnelle dynamique des histones, incluant la méthylation, l'acétylation et la phosphorylation, constitue le "code histone" qui régit la structure et la fonction de la chromatine.

La méthylation sur la lysine 9 de l'histone H3 (H3K9 ; correspondant à la position 10 dans l'entrée UniProt P68431 en incluant la méthionine initiateur) est une marque épigénétique critique. La diméthylation à ce site (H3K9me2) est catalysée par diverses méthyltransférases et est généralement associée à la répression transcriptionnelle et à la formation d'hétérochromatine. L'histone H3.1 canonique (P68431) et la variante testiculaire spécifique H3.1t (Q16695) contiennent toutes deux ce résidu lysine, qui est sujet à plusieurs types de modifications, incluant la di- et tri-méthylation. Références associées : PMID:11242053, PMID:16185088, PMID:16267050

L'histone H3 est principalement localisée dans le noyau et est un composant structurel des chromosomes. Alors que H3.1 est exprimée de manière ubiquitaire dans les cellules en réplication, H3.1t présente une spécificité tissulaire et se trouve principalement dans les cellules testiculaires, reflétant son rôle dans l'organisation de la chromatine pendant la spermatogenèse. Références associées : PMID:16567635

Le repliement de type immunoglobuline de l'histone H3, avec les autres histones centrales, facilite la formation de la particule centrale du nucléosome, fournissant une plateforme stable pour l'assemblage de la chromatine d'ordre supérieur. Les profils de modifications post-traductionnelles sur H3, incluant la diméthylation sur K9, sont régulés dynamiquement pendant le cycle cellulaire et le développement, influençant les profils d'expression génique.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique couvrant les acides aminés 1-100 de l'histone H3 humaine. Lors de l'utilisation de l'anticorps dans des applications telles que le Western blot (WB) ou l'immunohistochimie (IHC), envisagez de vérifier la spécificité par des tests de compétition peptidique ou en utilisant des échantillons témoins positifs et négatifs bien caractérisés.
• Pour l'immunoprécipitation de la chromatine (ChIP) et le ChIP-seq, la réactivité de l'anticorps avec H3K9 diméthylée (H3K9me2) peut être exploitée pour cartographier les domaines de chromatine répressive. Assurez-vous que les conditions de réticulation et de sonication sont optimisées pour votre type cellulaire.
• En WB, le poids moléculaire attendu de l'histone H3 est d'environ 15 kDa. Une bande nette à cette taille devrait être observée ; des bandes supplémentaires peuvent indiquer une liaison non spécifique, une optimisation de la dilution est donc recommandée.
• Cet anticorps est prédit avoir une large réactivité croisée basée sur la conservation des séquences, mais nous recommandons de valider la réactivité dans votre espèce et type d'échantillon spécifiques, en particulier pour les organismes non mammifères.

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