Anticorps Polyclonal de Lapin Anti-Asymétrique DiMéthyl-Histone H3-R17 (Q16695/P68431) pour WB, IF/ICC, ELISA

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de l'Histone H3 Asymétriquement DiMéthylée-R17

• L'histone H3 est un composant central du nucléosome, enroulant l'ADN en chromatine et jouant un rôle clé dans la régulation de la transcription, la réparation de l'ADN, la réplication de l'ADN et la stabilité chromosomique. Les modifications post-traductionnelles (MPT) des histones, collectivement appelées le code histone, régissent l'accessibilité et la fonction de la chromatine.
• La diméthylation asymétrique de l'histone H3 à l'arginine 17 (H3R17me2a ; correspondant à la position 18 dans la séquence canonique UniProt) est catalysée par la protéine arginine méthyltransférase CARM1 (coactivateur-associated arginine methyltransferase 1). Cette modification est associée à l'activation transcriptionnelle et au recrutement de complexes coactivateurs.
• L'histone H3.1 canonique (codée par de multiples gènes tels que H3C1, H3C2, etc. ; UniProt P68431) et le variant spécifique du testicule H3.1t (H3-4 ; UniProt Q16695) portent tous deux cette modification. H3.1t est exprimé dans les cellules testiculaires, tandis que H3.1 est exprimé de manière ubiquitaire dans les cellules somatiques.
• L'histone H3 se localise dans le noyau et se trouve principalement dans les nucléosomes le long des chromosomes. La queue N-terminale, où se situe R17, fait saillie à partir du cœur du nucléosome et est un point chaud pour de nombreuses MPT qui régulent l'expression génique.
• L'immunogène peptidique synthétique correspond aux 100 premiers acides aminés de l'histone H3 humaine, une région hautement conservée chez les eucaryotes, ce qui explique la large réactivité croisée prédite de cet anticorps. Références associées :
• PMID:15345777
• PMID:15471871
• PMID:16497732
• UniProt Q16695
• UniProt P68431

Guide Expérimental et Conseils Techniques

• Pour le Western blot (WB), les histones extraites à l'acide ou les lysats de cellules entières de lignées cellulaires pertinentes sont recommandés. Le poids moléculaire attendu de l'histone H3 est d'environ 15 kDa. Envisagez d'utiliser des tests de compétition par peptide ou des échantillons CARM1-knockout pour confirmer la spécificité de détection de la modification asymétrique diméthyl-R17.
• En immunofluorescence/immunocytochimie (IF/ICC), les conditions de fixation et de perméabilisation influencent significativement l'accessibilité de l'épitope. La fixation au méthanol améliore souvent le signal nucléaire ; optimisez la dilution de l'anticorps et les étapes de blocage pour minimiser le bruit de fond.
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut être utilisé avec des peptides synthétiques pour distinguer la forme asymétrique diméthyl-R17 des peptides H3 symétriquement diméthylés ou non modifiés. Incluez des contrôles appropriés pour assurer la spécificité.
• En raison de la large réactivité croisée prédite, validez l'anticorps dans votre modèle d'espèce et de tissu spécifique avant de l'appliquer à des expériences critiques.
• Cet anticorps est membre de la catégorie des Anticorps Méthylés et convient à la recherche épigénétique. Bien qu'il ne soit pas validé ici pour l'immunoprécipitation de la chromatine (ChIP) ou l'analyse multiplexée, il peut être intégré à d'autres réactifs spécifiques des modifications d'histones pour de telles applications avec une optimisation appropriée.

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