PolymAb® de lapin anti-Histone H4 pour WB, IF/ICC, IHC-P, ChIP, ELISA - P62805

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'Histone H4

• L'Histone H4 est l'une des quatre protéines histones centrales (H2A, H2B, H3, H4) qui forment l'octamère du nucléosome, enroulant environ 147 paires de bases d'ADN et compactant le génome en chromatine.
• En tant que composant central du nucléosome, l'Histone H4 joue un rôle central dans la régulation de l'accessibilité de l'ADN pour la transcription, la réplication, la réparation et le maintien de la stabilité chromosomique.
• Chez l'homme, l'Histone H4 est codée par 14 gènes quasi identiques (H4C1–H4C16) regroupés sur plusieurs locus chromosomiques, produisant une protéine conservée de 103 acides aminés.
• L'Histone H4 est localisée exclusivement dans le noyau et sur les chromosomes, où elle est soumise à de nombreuses modifications post-traductionnelles (acétylation, méthylation, phosphorylation, citrullination, ubiquitination, etc.) qui constituent le « code histone » régissant la dynamique de la chromatine.
• Les modifications sur la queue N-terminale (aa 1–20) sont essentielles pour la régulation génique ; par exemple, l'acétylation sur des lysines spécifiques est corrélée à une transcription active, tandis que la méthylation peut signaler soit une activation soit une répression selon le résidu concerné.
• Les perturbations des gènes de l'Histone H4 ou des marques de régulation sont liées à des maladies ; des mutations rares provoquent des phénotypes neurodéveloppementaux incluant une déficience intellectuelle, ce qui souligne la nature essentielle de l'Histone H4 au cours du développement.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène cible les acides aminés 1 à 100, incluant la queue N-terminale et le domaine globulaire ; à noter que la reconnaissance de l'épitope N-terminal peut être affectée par des modifications post-traductionnelles denses dans certains contextes de chromatine.
• Pour le Western blot (WB), une bande intense est attendue à ~11 kDa ; incluez des échantillons d'histones extraits par acide comme contrôle positif pour enrichir les protéines basiques.
• En immunofluorescence (IF/ICC) et en immunohistochimie (IHC-P), la chromatine compactée dans les régions hétérochromatiques peut masquer l'épitope ; une digestion douce à la DNAse ou des protocoles de perméabilisation douce peuvent améliorer la détection.
• Pour l'immunoprécipitation de la chromatine (ChIP), validez la capacité de l'anticorps à enrichir les nucléosomes modifiés par rapport aux non modifiés dans des conditions de réticulation croisée et natives, car l'accessibilité de l'épitope varie selon la compaction de la chromatine.
• Une réactivité croisée avec la souris et le rat est attendue compte tenu de la forte conservation de la séquence (l'Histone H4 humaine et de souris sont identiques) ; cependant, confirmez toujours la spécificité dans l'espèce et l'application concernées.

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