pAb Lapin Anti-Histone H3-R8 DiMéthylée Asymétrique (Q16695 / P68431) – Validé pour WB, IHC-P, ChIP, ELISA

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'Histone H3 (Diméthyl-R8 Asymétrique)

L'histone H3 est un composant central du nucléosome, qui enveloppe et compacte l'ADN en chromatine, limitant son accessibilité aux machineries cellulaires. Les histones jouent un rôle central dans la régulation de la transcription, la réparation de l'ADN, la réplication de l'ADN et la stabilité chromosomique. L'accessibilité de l'ADN est régulée de manière dynamique par un ensemble complexe de modifications post-traductionnelles (PTM), collectivement appelées le code histone, et par le remodelage des nucléosomes. Références associées : UniProt Q16695, UniProt P68431

Parmi les nombreuses PTM sur l'histone H3, la méthylation de l'arginine est catalysée par les protéines arginine méthyltransférases (PRMT) et peut se produire sous forme asymétrique ou symétrique. La diméthylation asymétrique de H3R2 est médiée par PRMT6 PMID:17898714, tandis que la diméthylation asymétrique de H3R17 est catalysée par CARM1 PMID:15345777. Le résidu H3R8 est connu pour être diméthylé symétriquement par PRMT5 ; cependant, la diméthyl-H3R8 asymétrique a également été rapportée comme une marque épigénétique spécifique. Cet anticorps cible l'état de diméthylation asymétrique sur R8, permettant de discriminer cette modification.

L'histone H3 est localisée dans le noyau et la chromatine. L'isoforme canonique H3.1 (P68431) est exprimée de manière ubiquitaire, tandis que la variante H3.1t (Q16695) est spécifiquement exprimée dans les cellules testiculaires. Références associées : PMID:16567635 (citrullination sur R8/R2/R17)

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique portant une diméthylation asymétrique sur R8 ; l'anticorps est supposé reconnaître spécifiquement cette modification. Cependant, en raison de l'homologie de séquence, une réactivité croisée avec d'autres variants ou sites d'histone H3 méthylés peut survenir. Validez la spécificité en utilisant la compétition par peptide, le knockout/knockdown ou la mutagenèse dirigée.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire attendu est d'environ 15 kDa. Les histones sont très basiques ; utilisez des gels acide-urée ou incluez les contrôles appropriés pour séparer les formes modifiées.
• Pour le ChIP, considérez que la diméthyl-H3R8 asymétrique peut marquer des états de chromatine spécifiques ; optimisez les conditions de réticulation et de fragmentation.
• Les applications listées incluent WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA et ChIP. Les dilutions doivent être déterminées empiriquement, et tous les tests doivent inclure des contrôles négatifs et positifs appropriés.
• Une réactivité croisée est prédite contre l'humain, la souris, le rat et d'autres espèces en raison de la forte conservation de l'histone H3. Vérifiez dans le système d'échantillon pertinent.

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