Anticorps polyclonal de lapin contre Histone H3-R8 diméthyl symétrique (Q16695/P68431) pour WB, ELISA, ChIP

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'histone H3

L'histone H3 est un composant essentiel du nucléosome, qui enroule et compacte l'ADN en chromatine, limitant ainsi l'accessibilité de l'ADN aux machineries cellulaires. Les histones jouent un rôle central dans la régulation de la transcription, la réparation de l'ADN, la réplication de l'ADN et la stabilité chromosomique. L'accessibilité de l'ADN est régulée par un ensemble complexe de modifications post-traductionnelles (MPT) des histones, également connu sous le nom de code histone, et par le remodelage des nucléosomes. Références associées : UniProtKB: Q16695, UniProtKB: P68431

L'histone canonique H3.1 (codée par plusieurs gènes tels que HIST1H3A-J) est exprimée de manière ubiquitaire, tandis que le variant H3.1t spécifique du testicule (codé par H3-4/HIST3H3) se trouve principalement dans les cellules testiculaires. Cet anticorps cible la diméthylation symétrique au niveau de l'arginine 8 (R8) de l'histone H3, une modification catalysée par la protéine arginine méthyltransférase 5 (PRMT5). La diméthylation symétrique au niveau de H3R8 a été impliquée dans la répression transcriptionnelle et le remodelage de la chromatine, contribuant à la régulation dynamique de l'expression génique. Références associées : UniProtKB: Q16695, UniProtKB: P68431

La modification se produit dans la queue N-terminale de l'histone H3, une région riche en MPT régulatrices, notamment l'acétylation, la méthylation, la phosphorylation et d'autres. L'interaction de ces marques régit la structure et la fonction de la chromatine, ce qui rend les anticorps spécifiques de site comme cet anticorps anti-H3R8 diméthyl symétrique indispensables pour la recherche épigénétique. Références associées : UniProtKB: Q16695, UniProtKB: P68431

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique diméthylé symétrique autour de R8 de l'histone H3 humaine, conçu pour reconnaître spécifiquement la marque de diméthylation symétrique. Lors de l'utilisation de cet anticorps en western blot (WB), gardez à l'esprit que le poids moléculaire prédit de l'histone H3 est d'environ 15 kDa. Assurez une extraction nucléaire complète pour une détection optimale.
• Pour l'ELISA, le revêtement direct du peptide synthétique ou d'extraits de nucléosomes peut être utilisé pour valider la liaison de l'anticorps. Incluez toujours des peptides témoins appropriés (non modifiés, diméthylés asymétriques ou d'autres états de méthylation) pour confirmer la spécificité.
• En immunoprécipitation de la chromatine (ChIP), cet anticorps peut être adapté à l'enrichissement des régions génomiques associées à H3R8 diméthylé symétrique. Les conditions de réticulation et de sonication doivent être optimisées pour votre type de cellule et vos loci cibles spécifiques.
• Compte tenu de la large réactivité croisée prédite (homme, souris, rat et autres), il est conseillé de valider l'anticorps dans le système d'échantillon concerné avant des expériences à grande échelle. Des variations de séquence spécifiques à l'espèce près de R8 peuvent influencer l'affinité de liaison ; consultez la séquence spécifique de l'histone H3 de l'organisme qui vous intéresse.
• Comme pour tout anticorps spécifique d'une modification, une variabilité d'un lot à l'autre peut exister. Titrez toujours l'anticorps pour déterminer la dilution de travail optimale pour votre essai spécifique.

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