Anticorps monoclonal de lapin anti-PARP1 pour IF/ICC, IF-P, IHC-P, ELISA - P09874

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PARP1

• PARP1 est une poly-ADP-ribosyltransférase qui médie la PARylation des protéines, principalement sur les résidus sérine, et joue un rôle clé dans la réparation de l'ADN. Références associées : PMID:17177976, PMID:18055453, PMID:18172500
• Il initie la réparation des cassures de l'ADN en reconnaissant et se liant aux cassures d'ADN dans la chromatine, en recrutant HPF1 et en catalysant la PARylation des histones (par exemple H2BS6ADPr, H3S10ADPr) pour décompacter la chromatine et faciliter l'accès des facteurs de réparation. Références associées : PMID:17177976, PMID:18172500, PMID:19344625
• PARP1 s'accumule sur les sites de dommages à l'ADN avec TIMELESS et favorise la réparation par recombinaison homologue des cassures double brin par médiation de la poly-ADP-ribosylation. Références associées : PMID:26344098, PMID:30356214
• Principalement nucléaire (chromatine, nucléole), PARP1 se translocate dynamiquement vers le cytoplasme lors de dommages à l'ADN ou de l'apoptose, où il régule des processus tels que l'inhibition de la voie cGAS-STING et l'apoptose médiée par AIFM1. Références associées : PMID:35460603, PMID:33168626
• PARP1 module la transcription en se liant aux nucléosomes et en modifiant la structure de la chromatine comme l'histone H1, agissant à la fois comme répresseur et régulateur dépendant du contexte de l'élongation de l'ARN polymérase II. Références associées : PMID:15607977, PMID:22464733, PMID:27256882, PMID:35393539
• Pendant l'apoptose, PARP1 est clivé par la caspase-3/7, générant des fragments qui se translocent vers le cytoplasme, subissent une auto-poly-ADP-ribosylation et agissent comme support pro-apoptotique de poly-ADP-ribose pour induire la mort cellulaire médiée par AIFM1. Références associées : PMID:33168626

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique correspondant aux acides aminés 700 à 800 de PARP1 humain (P09874). Cette région est située dans le domaine catalytique, ce qui peut contribuer à la spécificité de l'anticorps pour PARP1 pleine longueur.
• Pour l'immunofluorescence (IF/ICC et IF-P), envisagez d'utiliser des protocoles de fixation et de perméabilisation appropriés, et incluez des lignées cellulaires ou des tissus contrôles positifs et négatifs connus.
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P), les conditions de récupération d'antigène et la dilution de l'anticorps doivent être optimisées empiriquement ; utilisez des tissus humains, de souris ou de rat avec une expression confirmée de PARP1 comme contrôles positifs.
• En ELISA, l'appariement avec un anticorps de détection approprié peut améliorer la sensibilité ; validez le test avec la protéine PARP1 recombinante ou des lysats cellulaires.
• En raison du poids moléculaire élevé (113 kDa), assurez-vous de conditions de transfert de protéines optimales si vous utilisez le western blot comme méthode orthogonale.

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