Anticorps Monoclonal Lapin Anti-SARS-CoV Spike RBD pour WB et ELISA - P59594

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de la Glycoprotéine Spike

• La glycoprotéine Spike (S) du SARS-CoV, également connue sous le nom de E2 ou de protéine péplomérique, est une protéine de fusion virale de classe I qui médie l'entrée du virus dans les cellules hôtes.
• Elle attache le virion à la membrane de la cellule hôte en interagissant avec les récepteurs de l'hôte, principalement l'enzyme de conversion de l'angiotensine 2 (ACE2) et CLEC4M/DC-SIGNR, initiant ainsi l'infection.
• Suite à la liaison au récepteur et à l'internalisation du virus dans les endosomes, la protéine S subit des changements conformationnels. Le clivage protéolytique par la cathepsine L de l'hôte (CTSL) expose le peptide de fusion, permettant la fusion des membranes virales et endosomales.
• La protéine S fonctionne également comme une immunoevasine virale en régulant à la baisse la tetherine de l'hôte (BST2) par dégradation lysosomale, contrecarrant ainsi la réponse immunitaire innée de l'hôte.
• Au niveau subcellulaire, la protéine Spike est située sur la membrane du virion, la membrane de la cellule hôte et la membrane du compartiment intermédiaire entre le réticulum endoplasmique et l'appareil de Golgi de l'hôte.
• Les caractéristiques structurelles clés comprennent un peptide signal, un ectodomaine important contenant le domaine de liaison au récepteur (RBD), des régions de répétition héptadique formant une structure en trimer de cheveu à hélice, un domaine transmembranaire et une queue cytoplasmique. Elle est glycosylée par liaison N, contient des ponts disulfure et est palmitoylée.
• La glycoprotéine Spike est essentielle pour l'entrée du virus, la virulence et l'évasion immunitaire, ce qui en fait une cible majeure pour les réactifs de diagnostic et le développement de vaccins.

Conseils Expérimentaux et Techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 350-450 situés dans le RBD de la protéine Spike, par conséquent, cet anticorps peut permettre de détecter la protéine Spike pleine longueur (~139 kDa) ou la sous-unité clivée S1 en WB dans des conditions réductrices ou non réductrices.
• Pour la WB, envisagez d'utiliser une électrophorèse SDS-PAGE avec des contrôles appropriés tels que la protéine Spike recombinante ou des lysats de cellules infectées par le SARS-CoV. Validez l'anticorps dans le système d'échantillon pertinent pour confirmer la spécificité.
• Pour l'ELISA, des tests de capture ou de détection peuvent être conçus en utilisant le RBD ou la protéine Spike recombinante. Les tampons de revêtement optimaux et les dilutions d'anticorps doivent être déterminés expérimentalement.
• En raison de sa spécificité pour le RBD, cet anticorps peut être utile dans les tests de neutralisation ou de compétition, mais ces applications nécessitent une validation individuelle.

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