Anticorps monoclonal de lapin anti-RPA70/RPA1 pour WB, IP, ELISA, ChIP - P27694

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de RPA70/RPA1

• La sous-unité RPA70, codée par RPA1 (également appelée REPA1), est le composant de liaison à l'ADN de 70 kDa du complexe hétérotrimérique de la protéine de réplication A (RPA), qui comprend également les sous-unités RPA2 et RPA3. Ensemble, elles se lient aux intermédiaires d'ADN simple brin (ssDNA) et les stabilisent.
• RPA est indispensable à la réplication de l'ADN chromosomique et orchestre la réponse cellulaire aux dommages à l'ADN. Elle active les points de contrôle des dommages à l'ADN et facilite le choix de la voie de réparation. Références associées : PMID:9430682
• En recrutant ATRIP, RPA active la kinase ATR, un régulateur majeur de la réponse aux dommages de l'ADN, reliant la détection du ssDNA à la signalisation globale des points de contrôle. Références associées : PMID:24332808
• RPA est nécessaire au recrutement des facteurs de recombination homologue RAD51 et RAD52 sur la chromatine au niveau des sites de cassures double brin de l'ADN. Références associées : PMID:17765923
• Dans la réparation par excision de nucléotides (NER), RPA recrute directement XPA et XPG sur les sites endommagés et est essentielle pour l'étape de double incision/excision de cette voie de réparation. Références associées : PMID:7697716
• RPA contribue au maintien des télomères, préservant l'intégrité génomique, et des mutations dans RPA1 sont liées à des troubles de la biologie des télomères. Références associées : PMID:17959650 | PMID:34767620
• Un complexe RPA alternatif, aRPA, se forme lorsque RPA4 remplace RPA2. Ce complexe conserve la capacité de liaison au ssDNA mais fonctionne principalement dans la réparation de l'ADN plutôt que dans la réplication de l'ADN chromosomique. Références associées : PMID:19996105
• RPA stimule l'activité hélicase 5'-3' de BRIP1/FANCJ, la reliant à la réparation des pontages interbrins et maintenant la stabilité de la fourche de réplication. Références associées : PMID:17596542
• RPA70 est principalement nucléaire et se localise dans les corps PML. Elle est soumise à de nombreuses modifications post-traductionnelles, notamment phosphorylation, acétylation et ubiquitination, qui régulent son activité et ses interactions protéiques.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique situé dans la région N-terminale (acides aminés 1–100). Pour le Western blot, le poids moléculaire attendu est d'environ 68 kDa ; les lysats de cellules entières de cellules cultivées humaines ou de rat sont des matériaux de départ appropriés.
• Pour les tests ChIP, notez que l'épitope se trouve dans une région non structurée ; envisagez d'induire des dommages à l'ADN (par exemple, traitement aux UV ou à l'hydroxyurée) pour enrichir les loci liés à la RPA et vérifier les performances.
• Dans les applications IP et ELISA, pré-testez l'anticorps dans vos conditions tampons spécifiques, car il reconnaît un épitope linéaire. Incluez des contrôles appropriés.
• Validez la spécificité de l'anticorps dans votre système en utilisant des échantillons avec extinction par siRNA ou knockout par CRISPR/Cas9.

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