Anticorps Monoclonaux de Lapin Anti-PARP1 pour WB, IF, IHC, ELISA - P09874

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation du PARP1

• Le PARP1 fonctionne comme une poly-ADP-ribosyltransférase, catalysant le transfert d'unités ADP-ribose du NAD+ vers les protéines cibles. Cette activité est centrale pour la réparation des dommages à l'ADN et le maintien de l'intégrité du génome. Références connexes : PMID:17177976, PMID:18055453, PMID:18172500

• Lors de la reconnaissance de cassures de brins d'ADN, le PARP1 recrute HPF1 pour initier l'ADP-ribosylation de la sérine des histones (par exemple, H2B à la Ser6, H3 à la Ser10), conduisant à la décompaction de la chromatine et à l'assemblage de complexes de réparation. Références connexes : PMID:18172500, PMID:19344625, PMID:17177976

• Le PARP1 participe aux voies de réparation par excision de base (BER) et de réparation des cassures double-brin (DSBR). Il coopère avec TIMELESS pour promouvoir la recombinaison homologue en poly-ADP-ribosylant les facteurs de réparation. Références connexes : PMID:26344098, PMID:30356214

• Au-delà de la réparation de l'ADN, le PARP1 régule la transcription en se liant aux nucléosomes et en modifiant l'architecture de la chromatine d'une manière similaire à l'histone H1, réprimant ainsi l'activité de l'ARN polymérase II. Références connexes : PMID:15607977, PMID:22464733

• Le PARP1 est un médiateur critique de la mort cellulaire programmée. Son produit de clivage par la caspase-3/7 transloque dans le cytoplasme, transportant des chaînes de poly-ADP-ribose qui déclenchent l'apoptose dépendante d'AIFM1. Références connexes : PMID:33168626

• Au niveau subcellulaire, le PARP1 réside principalement dans le noyau, le nucléole et sur les chromosomes. Après phosphorylation par PRKDC, il peut transiter vers le cytoplasme où il module les voies immunitaires innées, telles que la voie cGAS-STING. Références connexes : PMID:35460603

• Le PARP1 catalyse sa propre auto-poly-ADP-ribosylation, une modification régulatrice majeure qui contrôle son activité, ses interactions protéiques et son recrutement sur les lésions de l'ADN. Références connexes : PMID:17396150, PMID:19764761, PMID:24906880

Conseils Expérimentaux et Astuces Techniques

• L'immunogène se situe dans les acides aminés 200–300 du PARP1 humain, une région contenant le deuxième doigt de zinc et une partie du domaine BRCT. L'anticorps monoclonal de lapin résultant est censé reconnaître un épitope conservé chez les espèces réactives listées (humain, souris, rat).
• Pour le Western blot (WB), une bande prédominante à environ 113 kDa devrait être détectée. Envisagez d'utiliser des extraits nucléaires comme source d'échantillon et validez la spécificité par knockdown du PARP1 médié par le siRNA.
• En immunofluorescence (IF/ICC) et immunohistochimie (IHC-P), anticipez des motifs de coloration nucléaire ou chromosomique. Comme les sections incluses en paraffine peuvent nécessiter une récupération d'antigène, optimisez les protocoles de récupération d'épitope induite par chaleur à base de citrate ou d'EDTA pour votre tissu.
• L'anticorps est signalé pour les applications ELISA. Pour un ELISA sandwich, le couplage avec un second clone ciblant un épitope distinct est recommandé ; un criblage par paires en interne peut identifier les combinaisons optimales de capture/détection.
• Étant donné que le PARP1 subit des modifications post-traductionnelles et un clivage importants, tenez compte du contexte biologique (par exemple, induction de dommages à l'ADN, apoptose) lors de l'interprétation des résultats. Les formes pleine longueur et clivées peuvent coexister selon les conditions de traitement.

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