Anticorps monoclonal de lapin Phospho-p53-S376 pour WB, ELISA - P04637

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de p53

• Facteur de transcription multifonctionnel qui agit comme un suppresseur de tumeur en induisant l'arrêt du cycle cellulaire ou l'apoptose en cas de dommages à l'ADN. Fonctionne en se liant à des séquences d'ADN spécifiques pour réguler l'expression des gènes cibles. Références associées : PMID:11025664, PMID:12524540, PMID:12810724
• Médie l'apoptose en partie par l'activation transcriptionnelle de gènes pro-apoptotiques tels que BAX et FAS, et la répression de l'anti-apoptotique Bcl-2. L'activité pro-apoptotique est modulée par des interactions avec les protéines ASPP PPP1R13B et TP53BP2, qui peuvent être déplacées par l'inhibiteur iASPP. Références associées : PMID:12524540, PMID:17189187
• Régule négativement la division cellulaire en contrôlant l'expression d'inhibiteurs du cycle cellulaire comme l'inhibiteur de kinase dépendante des cyclines p21, et peut empêcher l'activité kinase de CDK7 en réponse à des dommages à l'ADN.
• Se localise dans le noyau dans des conditions normales mais peut se transloquer vers le cytoplasme, les mitochondries et d'autres compartiments ; également trouvé dans les corps nucléaires PML, les centrosomes et le réticulum endoplasmique, reflétant ses fonctions diverses.
• Subit de nombreuses modifications post-traductionnelles incluant phosphorylation, acétylation, méthylation, ubiquitination et sumoylation, qui régulent sa stabilité, sa liaison à l'ADN et son activité transcriptionnelle.
• Exprimé de manière ubiquitaire dans les tissus ; de multiples isoformes sont générées par épissage alternatif et utilisation de promoteurs, certaines présentant une expression et des fonctions régulatrices spécifiques aux tissus (par exemple, l'isoforme 2 améliore la transactivation, l'isoforme 4 la supprime, l'isoforme 7 inhibe l'apoptose).
• Régule le rythme circadien en réprimant l'activation médiée par CLOCK-BMAL1 du gène PER2. Références associées : PMID:24051492
• Agit comme un suppresseur de tumeur clé, les mutations du gène TP53 étant liées au syndrome de Li-Fraumeni et à de nombreux cancers sporadiques, soulignant son rôle critique dans le maintien de la stabilité génomique.

Guide expérimental et conseils techniques

• Cet anticorps a été généré contre un peptide phospho-synthétique correspondant aux résidus autour de S376 de la p53 humaine. Assurez une détection correcte de l'état de phosphorylation en utilisant des inhibiteurs de phosphatases pendant la lyse cellulaire et la préparation des échantillons.
• Pour le Western blot, le traitement des cellules avec des agents endommageant l'ADN (par exemple, la doxorubicine ou l'irradiation UV) peut augmenter la phosphorylation de p53 sur S376, fournissant un contrôle positif. Le poids moléculaire prédit est d'environ 44 kDa, mais plusieurs bandes peuvent apparaître en raison d'isoformes d'épissage.
• En ELISA, envisagez d'utiliser une protéine p53 recombinante phosphorylée sur S376 comme standard et validez la spécificité du test avec des contrôles de peptide non phosphorylé.
• La réactivité croisée a été confirmée avec la p53 humaine et de rat ; pour d'autres espèces, une analyse d'homologie de séquence autour de S376 est recommandée avant utilisation.

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