Anticorps polyclonal de lapin anti-Phospho-p53 (S33) pour WB, IHC-P, IP, ELISA - P04637

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de p53

• Encodé par le gène TP53, l'antigène tumoral cellulaire p53 est un facteur de transcription multifonctionnel qui agit comme un puissant suppresseur de tumeur en régulant l'arrêt du cycle cellulaire, la réparation de l'ADN et l'apoptose en réponse à divers stress cellulaires. Références associées : PMID:11025664 PMID:12524540 PMID:12810724

• p53 exerce ses fonctions pro-apoptotiques à la fois par activation transcriptionnelle (par ex. BAX et FAS) et répression transcriptionnelle (par ex. Bcl-2), son activité étant modulée par des interactions avec les protéines de la famille ASPP. Références associées : PMID:12524540 PMID:17189187

• Au-delà de la transcription nucléaire, p53 se localise également dans le cytoplasme, les mitochondries, le réticulum endoplasmique et les centrosomes, reflétant son implication dans l'apoptose et la nécrose non transcriptionnelles.

• p53 est exprimée de manière ubiquitaire dans les tissus humains normaux, avec plusieurs isoformes alternatives présentant des profils d'expression dépendants du tissu.

• Les principales modifications post-traductionnelles comprennent la phosphorylation, l'acétylation, la méthylation et l'ubiquitination, qui régulent étroitement la stabilité, la localisation subcellulaire et l'activité transcriptionnelle de p53.

• p53 contribue à la régulation de l'horloge circadienne en réprimant l'activation transcriptionnelle de PER2 médiée par CLOCK-BMAL1. Références associées : PMID:24051492

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un phosphopeptide synthétique correspondant aux résidus entourant la Ser33 de la p53 humaine. Pour valider la spécificité phospho, envisagez d'utiliser en parallèle des échantillons traités à la phosphatase lambda ou une compétition avec un peptide non phosphorylé.
• Pour le western blot (WB), la taille de bande prédite est d'environ 53 kDa (p53 canonique) ou 44 kDa (certaines isoformes) ; les bandes peuvent légèrement se décaler en raison de la phosphorylation et d'autres modifications.
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P), les conditions de récupération antigénique et la fixation tissulaire peuvent affecter la détection de l'épitope phospho ; optimisez en utilisant des contrôles positifs connus tels que des tissus irradiés ou traités par un stress génotoxique.
• Lors de la réalisation d'une immunoprécipitation (IP) ou d'un ELISA, incluez des contrôles IgG appropriés et envisagez de coupler avec un anticorps anti-p53 total pour évaluer la stoechiométrie de la phosphorylation.
• Cet anticorps présente une réactivité croisée avec la p53 de souris et de rat, le rendant adapté aux études translationnelles ; cependant, confirmez toujours la réactivité croisée dans votre système modèle spécifique.

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