Anticorps monoclonal de lapin anti-HLTF pour WB, ELISA - Q14527

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de HLTF

• HLTF (Helicase-like transcription factor) est une protéine multifonctionnelle combinant des activités d'ATPase dépendante de l'ADN, de ligase E3 d'ubiquitine-protéine et de remodelage de la chromatine, codée par le gène HLTF (également connu sous le nom de HIP116A, RNF80, SMARCA3, SNF2L3, ZBU1). Il joue un rôle crucial dans la tolérance aux dommages à l'ADN, la régulation épigénétique et la transcription. Références associées : PMID:18316726 PMID:18719106 PMID:26051180
• En tant qu'effecteur clé dans la réparation post-réplication, HLTF catalyse la polyubiquitination liée à la 'Lys-63' de PCNA monoubiquitinée au niveau de la 'Lys-164' en réponse à un stress génotoxique, favorisant un changement de matrice sans erreur pour contourner les lésions de l'ADN. Références associées : PMID:18316726 PMID:18719106
• HLTF agit comme un régulateur épigénétique en se liant à l'histone H3 triméthylée au niveau de la 'Lys-9' (H3K9me3) et en médiant la polyubiquitination de l'histone H3 au niveau de la 'Lys-23' (H3K23ub), qui sert de site d'amarrage pour DNMT1, assurant ainsi le maintien de la méthylation de l'ADN couplée à la réplication. Références associées : PMID:40680746
• Il présente une activité de translocation d'ADNdb dépendante de l'ATP sans activité hélicase classique, médiant le renversement de la fourche de réplication en déroulant et en réassociant les brins naissants et parentaux pour supprimer la synthèse d'ADN et maintenir la stabilité génomique. Références associées : PMID:1994885
• HLTF coopère avec MSH2 pour résoudre les structures d'ADN G-quadruplexe (G4), limitant le stress de réplication et l'accumulation de G4 tout au long du cycle cellulaire. Références associées : PMID:39142279
• Il contribue à la réparation par excision de nucléotides en évacuant les oligonucleotides contenant des lésions grâce à son domaine HIRAN, et peut également déplacer l'ADN simple brin des structures triplex grâce à sa translocation dépendante de l'ATP. Références associées : PMID:26051180 PMID:31960921
• La localisation subcellulaire est principalement nucléaire et associée aux chromosomes, ce qui est cohérent avec ses rôles dans la réparation de l'ADN et la dynamique de la chromatine.
• Exprimé dans de multiples tissus, y compris le cerveau, le cœur, le rein, le foie, le poumon, le pancréas, le placenta et le muscle squelettique. La protéine est soumise à une initiation alternative, à une liaison à l'ATP, à une liaison aux métaux (doigt de zinc), à la méthylation et à la phosphorylation, reflétant sa régulation par de multiples modifications post-traductionnelles.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique correspondant aux acides aminés 900-1009 de HLTF humain, une région sélectionnée pour sa spécificité et probablement accessible dans des conditions dénaturantes. Pour le WB, envisagez d'utiliser des lysats de cellules entières ou des extraits nucléaires de lignées cellulaires humaines, murines ou de rat, car une réactivité croisée a été rapportée pour ces espèces.
• En raison du poids moléculaire prédit élevé (~114 kDa), assurez une séparation protéique adéquate en utilisant des pourcentages de gel appropriés et des temps de transfert prolongés lors du western blot.
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection ; envisagez de le coupler avec un anticorps apparié validé si vous développez un test sandwich, et optimisez les conditions de revêtement pour le peptide synthétique ou la cible recombinante.
• Étant donné que HLTF subit de multiples modifications post-traductionnelles (ubiquitination, phosphorylation, méthylation), des décalages de bandes peuvent être observés ; validez la capacité de l'anticorps à détecter les formes modifiées dans le système d'échantillon pertinent.

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