Anticorps monoclonal de lapin anti-HLA-DRB1 pour WB, IHC-P, ELISA - P01911

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du HLA-DRB1

• Le HLA-DRB1 code pour la chaîne bêta de la molécule du CMH de classe II, qui s'associe à la chaîne alpha HLA-DRA pour présenter des peptides antigéniques aux lymphocytes T CD4+, orchestrant ainsi les réponses immunitaires adaptatives.
• La rainure de liaison au peptide accueille généralement des antigènes extracellulaires de 10 à 30 acides aminés dérivés de protéines endocytées, avec un résidu d'ancrage clé en position 1 (PubMed:8145819). Références associées : PMID:8145819
• En plus de la présentation d'antigènes exogènes, le HLA-DRB1 peut présenter des peptides intracellulaires via l'autophagie, ce qui est important pour la sélection des lymphocytes T thymiques et la tolérance centrale (PubMed:17182262, PubMed:23783831). Références associées : PMID:17182262 PMID:23783831
• Au niveau subcellulaire, la protéine se localise sur la membrane cellulaire, le réticulum endoplasmique et les compartiments endolysosomaux (endosomes tardifs, lysosomes, autolysosomes), reflétant ses rôles dans le trafic et le traitement des antigènes.
• L'expression tissulaire se situe principalement dans les cellules présentatrices d'antigènes professionnelles : monocytes/macrophages, cellules dendritiques et lymphocytes B, ainsi que dans les cellules épithéliales thymiques (PubMed:19830726, PubMed:23783831, PubMed:31495665). Références associées : PMID:19830726 PMID:23783831 PMID:31495665
• Le HLA-DRB1 est hautement polymorphe, avec des centaines de variants alléliques ; des allèles spécifiques sont associés à la présentation d'épitopes dérivés d'agents pathogènes distincts, influençant la susceptibilité aux maladies infectieuses et à l'auto-immunité (PubMed:22327072, PubMed:29884618, PubMed:27591323). Références associées : PMID:22327072 PMID:29884618 PMID:27591323
• La protéine subit des modifications post-traductionnelles, notamment la glycosylation et la formation de ponts disulfure, et sert également de récepteur pour l'entrée du virus d'Epstein-Barr dans les lymphocytes.
• Les mots-clés biologiques clés incluent l'immunité adaptative, le CMH II, la glycoprotéine et la protéine transmembranaire, soulignant son rôle central dans la reconnaissance et la signalisation immunitaires.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique couvrant les résidus 100–200 du HLA-DRB1 humain (P01911). Cette région peut inclure des parties du domaine bêta-2 ; tenez compte de sa conservation entre les allèles lors de l'interprétation de la réactivité croisée dans vos expériences.
• Pour le Western Blot (WB), le poids moléculaire prédit est d'environ 30 kDa ; validez avec des contrôles positifs appropriés (par exemple, lignées cellulaires lymphoblastoïdes ou cellules mononucléées du sang périphérique isolées) dans des conditions réductrices.
• En immunohistochimie (IHC-P), des méthodes de récupération d'antigène (par exemple, récupération d'épitope induite par la chaleur dans un tampon citrate) peuvent être nécessaires pour exposer l'épitope dans les tissus fixés au formol et inclus en paraffine.
• Pour les applications ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection ; optimisez les conditions de revêtement et utilisez la protéine HLA-DRB1 recombinante ou des complexes peptide-HLA comme étalons.
• Compte tenu du polymorphisme du HLA-DRB1, confirmez la réactivité spécifique à l'allèle si nécessaire en utilisant des lignées cellulaires modifiées exprimant des allèles définis ou par séquençage.
• Comme pour tout anticorps monoclonal, effectuez des dilutions en série et incluez des contrôles d'isotype pour garantir la spécificité et minimiser le bruit de fond.

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