Anticorps polyclonal de lapin anti-ADN Ligase III/LIG3 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P49916

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'ADN Ligase III

• L'ADN ligase 3 (LIG3) existe sous plusieurs isoformes : l'isoforme 3 (nucléaire) et l'isoforme 1 (mitochondriale), avec des noms alternatifs incluant LIG2, LIG3alpha et MTDPS20.
• L'isoforme 3 (nucléaire) forme un hétérodimère avec XRCC1 et participe à la réparation des cassures de brins d'ADN et à la correction des échanges entre chromatides sœurs suite à des dommages par rayonnements ionisants et agents alkylants. Références associées : PMID:10207110 | PMID:24674627
• L'isoforme 1 (mitochondriale) agit comme une ADN ligase dans la réparation par excision de base mitochondriale (mtBER), cruciale pour maintenir l'intégrité du génome mitochondrial. Références associées : PMID:10207110 | PMID:24674627
• La localisation subcellulaire est à la fois nucléaire et mitochondriale, ce qui correspond à ses rôles doubles dans la maintenance de l'ADN génomique et mitochondrial.
• Exprimée principalement dans les testicules, le thymus, la prostate et le cœur, reflétant les tissus à forte demande métabolique ou proliférative.
• Contient un domaine de liaison à l'ATP, deux motifs à doigt de zinc, et nécessite du magnésium comme cofacteur pour son activité ligase dépendante de l'ATP.
• Les mutations du gène sont associées au syndrome de déplétion de l'ADN mitochondrial 20 (MTDPS20), une maladie mitochondriale primaire, soulignant sa fonction mitochondriale essentielle.
• Impliquée dans des processus cellulaires plus larges incluant la réplication de l'ADN, la recombination et la progression du cycle celluel, reliant la réparation de l'ADN à la stabilité du génome.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 254–460, une région conservée entre les isoformes nucléaire et mitochondriale ; par conséquent, l'anticorps peut reconnaître les deux formes.
• Pour le Western blot, anticipez une bande dominante près de 113 kDa ; incluez des contrôles positifs appropriés (par ex., lysat de HeLa, HEK293 ou testicule) et validez dans le système d'échantillon pertinent.
• En IHC-P, considérez les méthodes de démasquage antigénique et les profils d'expression spécifiques aux tissus ; les testicules, le thymus, la prostate et le cœur sont des tissus positifs appropriés.
• La réactivité croisée avec la souris et le rat permet l'application dans des organismes modèles courants ; cependant, vérifiez la réactivité spécifique à l'espèce dans votre configuration expérimentale.
• La nature polyclonale peut offrir un signal robuste, mais la cohérence entre les lots doit être évaluée pour les dosages quantitatifs.
• Pour l'ELISA et l'IF/ICC, optimisez la dilution de l'anticorps primaire et les conditions de détection en utilisant des contrôles positifs et négatifs connus.

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