Anticorps monoclonal anti-DNA ligase III/LIG3 pour WB, IHC-P, ELISA - P49916

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de la DNA ligase III/LIG3

• Le gène de la DNA ligase 3 (LIG3) code plusieurs isoformes : l’isoforme 3 forme un hétérodimère avec XRCC1 dans le noyau afin de corriger les défauts de réparation des cassures simple brin de l’ADN et de l’échange entre chromatides sœurs après une irradiation ionisante et l’exposition à des agents alkylants, tandis que l’isoforme 1 est dirigée vers les mitochondries et intervient dans la réparation de l’ADN mitochondrial par excision de bases. Références associées : PMID:10207110 PMID:24674627
• La protéine contient des motifs essentiels en doigt de zinc et appartient à la famille des DNA ligases dépendantes de l’ATP, jouant des rôles clés dans la recombinaison, la réplication et la réparation de l’ADN.
• LIG3 se localise à la fois dans le noyau et les mitochondries, ce qui lui permet d’assurer sa double fonction dans le maintien de l’intégrité génomique et mitochondriale.
• Il s’agit d’une phosphoprotéine qui joue des rôles régulateurs au cours du cycle cellulaire, notamment lors de la division cellulaire et de la réplication de l’ADN.
• Une forte expression est observée dans les testicules, le thymus, la prostate et le cœur, ce qui indique des besoins de réparation de l’ADN spécifiques aux tissus.
• Les mutations de LIG3 sont associées au syndrome de déplétion de l’ADN mitochondrial 20 (MTDPS20), une maladie mitochondriale primaire.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène (aa 400–500) se situe dans une région conservée ; une réactivité croisée avec la souris et le rat est attendue sur la base de l’homologie de séquence, mais une validation dans le système d’échantillon concerné est recommandée.
• Pour le Western blot, prévoir une bande à environ 113 kDa ; envisager l’utilisation d’un gel à faible pourcentage d’acrylamide et prolonger les temps de transfert afin d’assurer un transfert efficace des protéines de haut poids moléculaire.
• Pour l’IHC-P, optimiser la récupération antigénique par récupération d’épitope induite par la chaleur (par exemple, tampon citrate pH 6,0 ou tampon EDTA pH 9,0) et valider avec des contrôles tissulaires appropriés.
• Les protocoles ELISA peuvent utiliser une détection directe ou indirecte ; l’association avec un anticorps de détection validé ciblant un épitope différent peut améliorer la sensibilité du test.

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