Anticorps Polyclonal de Lapin Anti-DARS pour WB, IHC-P, IP, ELISA - P14868

Spécifications et Paramètres Essentiels du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de la DARS

• La DARS, également connue sous le nom d'aspartyl-ARNt synthétase (AspRS) et de protéine du gène 40 induisant la prolifération cellulaire, est codée par le gène DARS1 chez l'homme. Elle appartient à la famille des aminoacyl-ARNt synthétases de classe II, qui joue un rôle fondamental dans la traduction des protéines.
• L'enzyme catalyse la fixation spécifique de l'aspartate à son ARNt cognat en deux étapes : l'aspartate est d'abord activé par l'ATP pour former de l'aspartyl-AMP, puis transféré à l'extrémité acceptrice de l'ARNt, une étape critique pour une synthèse protéique cytoplasmique précise.
• Principalement localisée dans le cytosol, la DARS est essentielle pour fournir l'aspartyl-ARNt nécessaire à la traduction ribosomique, impactant directement le maintien et la croissance du protéome cellulaire.
• L'analyse de l'expression tissulaire spécifique montre des niveaux élevés dans le cerveau en développement et adulte, en particulier dans les zones ventriculaires/sous-ventriculaires, les sous-champs hippocampiques et le cortex cérébral, avec une expression préférentielle dans les neurones. Les neurones périphériques du côlon expriment également la DARS.
• Des études protéomiques ont identifié l'acétylation et la phosphorylation de la DARS, des modifications post-traductionnelles qui pourraient moduler son activité enzymatique, sa distribution subcellulaire ou ses interactions protéine-protéine.
• Des mutations pathogènes dans DARS sont associées à la leucoencéphalopathie avec atteinte du tronc cérébral et de la moelle épinière et élévation du lactate (HBSL), un trouble neurologique sévère, soulignant le rôle critique de l'enzyme dans le système nerveux central.

Guide Expérimental et Conseils Techniques

• La séquence immunogène (aa 222–501) réside dans un domaine catalytique conservé de la DARS ; cette région présente une forte identité entre l'homme, la souris et le rat, ce qui soutient la réactivité croisée observée.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est d'environ 57 kDa. Il est conseillé de valider l'anticorps en utilisant des contrôles positifs tels que des lysats de cellules HeLa, HEK293 ou de cerveau de souris/rat, et de considérer à la fois des conditions réductrices et non réductrices.
• En immunohistochimie (IHC-P), la récupération antigénique optimale et la dilution de l'anticorps doivent être déterminées empiriquement. La DARS est fortement exprimée dans les tissus cérébraux ; ainsi, des coupes de cerveau humain ou de rongeur sont recommandées pour la validation initiale.
• Lors de l'immunoprécipitation, la nature polyclonale de l'anticorps peut améliorer la capture des complexes DARS natifs. Incluez des contrôles isotypiques appropriés et des étapes de pré-nettoyage pour réduire le bruit de fond.
• Pour les applications ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection. Un titrage et des tests de réactivité croisée contre des synthétases étroitement apparentées sont recommandés pour assurer la spécificité.
• Les modèles de knockdown ou knockout peuvent servir de contrôles négatifs pour confirmer la spécificité de l'anticorps, en particulier dans les applications quantitatives où une quantification précise est nécessaire.

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