Anticorps monoclonal ZAP70 de lapin pour WB, IF-P, ELISA - P43403

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de ZAP70

• La tyrosine-protéine kinase ZAP-70 (protéine associée à la chaîne zeta de 70 kDa, tyrosine kinase liée à Syk) est codée par le gène ZAP70 et existe sous forme d'isoformes issues d'épissage alternatif.
• Agit comme une kinase de signalisation essentielle dans la réponse immunitaire adaptative : régule l'activation, la prolifération, la différenciation, la motilité, l'adhésion des lymphocytes T et l'expression des cytokines ; contribue également au développement des thymocytes et à l'activation primaire des lymphocytes B.
• Lors de la stimulation du récepteur des lymphocytes T (TCR), ZAP70 est recrutée sur les motifs ITAM phosphorylés de CD3E et CD3Z au niveau de la membrane plasmique, où elle est activée par phosphorylation médiée par LCK. ZAP70 activée phosphoryle les protéines adaptatrices LAT et LCP2, initiant les cascades de signalisation en aval. Références associées : PMID:7509083
• Médie l'internalisation et la dégradation du complexe TCR en interagissant avec l'E3 ubiquitine ligase CBL et les adaptateurs SLA/SLA2, modulant l'expression du TCR à la surface et la durée de la signalisation.
• Localisation subcellulaire : cytoplasme et membrane cellulaire ; se transloque vers la membrane plasmique lors de la liaison du TCR.
• Spécificité tissulaire : exprimée dans les lymphocytes T, les cellules natural killer, les thymocytes immatures et les pro/pré-lymphocytes B.
• Modifications post-traductionnelles : la phosphorylation, l'acétylation et l'ubiquitination régulent son activité et sa stabilité. Contient des domaines SH2 et un domaine kinase. Mots-clés : structure 3D, phosphoprotéine, conjugaison Ubl, liaison isopeptidique, variant pathologique, SCID.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est une protéine de fusion recombinante représentant les acides aminés 550-619 du domaine kinase C-terminal de ZAP70 humain. Pour le Western blot, attendez une bande spécifique autour de 70 kDa dans les lignées de lymphocytes T humains (par exemple Jurkat) ou les cellules mononucléées du sang périphérique (PBMC).
• Pour l'immunofluorescence (IF-P), la perméabilisation est nécessaire pour détecter ZAP70 intracellulaire et associé à la membrane ; envisagez d'utiliser des activateurs de lymphocytes T pour améliorer le signal.
• Pour les applications ELISA, validez les performances de l'anticorps avec la protéine ZAP70 recombinante ou des lysats cellulaires d'échantillons de lymphocytes T pertinents ; réalisez une titration optimale.
• La réactivité croisée rapportée concerne l'espèce humaine. Si vous testez d'autres espèces, vérifiez la conservation de la séquence de la région de l'immunogène, en particulier dans le domaine kinase.

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