Ac polyclonal de lapin anti-YKL-40/CHI3L1 - P36222

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de YKL-40/CHI3L1

• CHI3L1 (protéine 1 ressemblant à la chitinase-3), également connue sous les noms YKL-40, GP-39, CGP-39 ou HC-gp39, est une glycoprotéine sécrétée appartenant à la famille 18 des glycosyl-hydrolases, mais dépourvue d’activité catalytique de chitinase.
• Elle agit comme une lectine de liaison aux glucides, avec une préférence pour la chitine, et joue un rôle clé dans le remodelage tissulaire et l’adaptation cellulaire aux changements environnementaux, notamment dans les conditions inflammatoires.
• CHI3L1 est impliquée dans les réponses inflammatoires des lymphocytes T auxiliaires de type 2 (Th2) et dans l’inflammation induite par l’IL-13, en régulant la sensibilisation aux allergènes, l’apoptose des cellules inflammatoires, l’accumulation des cellules dendritiques et la différenciation des macrophages M2.
• Dans les poumons, CHI3L1 régule les réponses antibactériennes en contribuant à l’élimination des bactéries par les macrophages, au contrôle de leur dissémination et au renforcement de la tolérance de l’hôte. Elle intervient également dans les lésions, l’inflammation et l’apoptose épithéliale induites par l’hyperoxie.
• Au niveau subcellulaire, CHI3L1 est principalement sécrétée dans l’espace extracellulaire, mais peut également être détectée dans le cytoplasme, la région périnucléaire et le réticulum endoplasmique.
• L’expression tissulaire est importante dans les macrophages activés, les chondrocytes articulaires, les cellules synoviales et le foie. L’expression est très faible ou indétectable dans le côlon non inflammatoire, les muscles, les poumons, le pancréas, les cellules mononucléées et les fibroblastes.
• La protéine subit une glycosylation et contient un peptide signal ainsi que des ponts disulfure, ce qui peut influencer son poids moléculaire apparent en SDS-PAGE (environ 43 kDa, supérieur aux 42,6 kDa prédits).

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène couvre les acides aminés 22 à 220, correspondant à la forme mature sécrétée ; l’anticorps devrait détecter CHI3L1 endogène dans les échantillons humains, murins et de rat.
• En western blot, une bande située autour de 43 kDa est généralement observée. La glycosylation et d’autres modifications peuvent provoquer de légers décalages ; envisagez une validation avec des enzymes de déglycosylation si une confirmation précise de la masse est nécessaire.
• En immunohistochimie (IHC-P), une récupération antigénique peut être nécessaire. Les contrôles positifs comprennent les tissus synoviaux enflammés, le foie ou les échantillons riches en macrophages activés.
• Pour l’IF/ICC, la localisation cellulaire (sécrétée/cytoplasmique) doit être confirmée à l’aide de protocoles de fixation et de perméabilisation appropriés. Un double marquage avec des marqueurs d’organites peut aider à vérifier la localisation périnucléaire ou dans le réticulum endoplasmique.
• Les applications ELISA peuvent être utilisées pour quantifier CHI3L1 dans les liquides biologiques (sérum, plasma, surnageants de culture) ; envisagez de l’associer à un anticorps de détection apparié lors du développement d’un ELISA sandwich.
• Validez toujours l’anticorps dans votre système d’échantillons et vos conditions d’essai spécifiques, car les performances peuvent varier en fonction des modifications post-traductionnelles et des niveaux d’expression.

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