WNK3 Lapin mAb - Q9BYP7

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de WNK3

• WNK3 est une sérine/thréonine-protéine kinase de la famille WNK (With No Lysine), également désignée PRKWNK3. Elle constitue un composant clé en amont de la cascade kinase WNK-SPAK/OSR1.
• WNK3 régule l'homéostasie des électrolytes et la récupération du volume cellulaire en phosphorylant et en activant les kinases en aval OXSR1/OSR1 et STK39/SPAK en réponse à un stress hyperosmotique. Références associées : PMID:16275911 PMID:16275913 PMID:16501604 PMID:22989884
• Dans des conditions hyperosmotiques, WNK3 agit comme un capteur moléculaire d'encombrement, subissant une séparation de phases liquide-liquide pour former des compartiments sans membrane qui concentrent la kinase avec ses substrats, favorisant ainsi une transduction du signal efficace. Références associées : PMID:36318922
• Les kinases OXSR1/OSR1 et STK39/SPAK activées phosphorylent ensuite les cotransporteurs cation-chlorure : elles activent les cotransporteurs Na-K-Cl (par exemple, SLC12A2/NKCC1) et inhibent les cotransporteurs K-Cl (par exemple, SLC12A4/KCC1, SLC12A5/KCC2, SLC12A6/KCC3), ce qui ensemble médie l'augmentation régulatrice du volume. Références associées : PMID:16275911 PMID:16275913 PMID:16357011
• WNK3 phosphoryle également WNK4, modulant potentiellement l'activité de NCC (SLC12A3), et pourrait phosphoryler NEDD4L. Indépendamment de son activité kinase, WNK3 peut agir comme une protéine d'échafaudage pour réguler négativement la localisation membranaire de canaux tels que KCNJ1 et SLC26A9. Références associées : PMID:16357011 PMID:17975670 PMID:20525693 PMID:17673510
• WNK3 améliore l'influx calcique médié par TRPV5 et TRPV6 en augmentant leurs niveaux d'expression membranaire via un mécanisme dépendant de la kinase. Références associées : PMID:18768590
• La protéine se localise principalement dans le cytoplasme.
• WNK3 est largement exprimée dans le cerveau adulte, les poumons, les reins, le foie et le pancréas, ainsi que dans les tissus fœtaux. L'isoforme 1 est spécifique au cerveau, tandis que l'isoforme 3 est spécifique aux reins. Des mutations de WNK3 ont été associées à une déficience intellectuelle.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène correspond à un peptide C-terminal (acides aminés 1700-1800), ciblant une région qui peut être bien exposée et adaptée à la détection de la protéine pleine longueur.
• Pour le Western blot, envisagez d'utiliser un gel SDS-PAGE à faible pourcentage (par exemple, 6–8 %) pour séparer efficacement la grande protéine WNK3 de 198 kDa et incluez des marqueurs de poids moléculaire appropriés.
• La réactivité croisée de l'anticorps avec la souris et le rat suggère un épitope conservé ; cependant, une validation dans l'espèce et le système d'échantillon pertinent est recommandée.
• L'anticorps est adapté à l'IHC-P et à l'ELISA en plus du WB ; il est conseillé d'optimiser les méthodes de démasquage antigénique et les dilutions d'anticorps pour chaque application et type de tissu.
• Étant donné que la signalisation WNK3 est activée sous stress hyperosmotique, envisagez de prétraiter les cellules ou les tissus avec des stimuli hyperosmotiques (par exemple, du saccharose) pour améliorer la détection des cibles phosphorylées en aval lors de l'évaluation de l'activation de la voie.

CamelBio : Votre pont d'approvisionnement unique

CamelBio soutient les fabricants de diagnostics et les laboratoires de recherche en leur offrant un accès fiable à des matières premières IVD de haute qualité, notamment des paires d'anticorps validées, des anticorps monoclonaux et polyclonaux optimisés, des réactifs auxiliaires en vrac et l'approvisionnement en cibles rares. Pour les études liées à WNK3 dans l'homéostasie des électrolytes, la signalisation des kinases et la régulation du volume, CamelBio propose des solutions d'approvisionnement uniques adaptées à votre pipeline de développement, de la faisabilité initiale à la production à grande échelle.