Anticorps monoclonal de lapin anti-βII-tubuline/β2-tubuline pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q13885 / Q9BVA1

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de la βII-tubuline/β2-tubuline

• La βII-tubuline (TUBB2A) et la β2-tubuline (TUBB2B) sont des isotypes de la β-tubuline de classe II qui s’hétérodimérisent avec l’α-tubuline pour former des microtubules, des polymères essentiels du cytosquelette.
• Les microtubules servent de voies dynamiques pour le transport intracellulaire, la formation du fuseau mitotique et le maintien de la forme cellulaire, en se développant par ajout de dimères de tubuline liés au GTP.
• Les sous-unités de β-tubuline contiennent un site de liaison au GTP et régulent la stabilité des microtubules par l’hydrolyse du GTP, tandis que l’α-tubuline fournit l’activité GTPase.
• La βII-tubuline est fortement exprimée dans le cerveau, où elle représente jusqu’à 30 % de l’ensemble des β-tubulines, et joue un rôle essentiel dans le développement et le fonctionnement des neurones.
• Des modifications post-traductionnelles telles que l’acétylation, la phosphorylation et la méthylation modulent les propriétés des microtubules ainsi que leurs interactions avec les protéines motrices.
• Les mutations de TUBB2A sont associées à des troubles neurologiques, notamment la dysplasie corticale complexe avec d’autres malformations cérébrales 5, ce qui souligne son importance dans le système nerveux central.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène correspond à un peptide situé entre les acides aminés 346 et 445 de la βII-tubuline/β2-tubuline humaine (Q13885), une région conservée entre TUBB2A et TUBB2B, ce qui rend l’anticorps adapté à la détection des deux isotypes.
• Pour le Western blot, une bande d’environ 50 kDa est attendue ; optimisez les quantités chargées, généralement de 10 à 30 µg de protéines totales, ainsi que la dilution de l’anticorps pour votre échantillon spécifique.
• En immunohistochimie (IHC-P), les méthodes de récupération antigénique utilisant des tampons citrate ou EDTA peuvent améliorer le signal, notamment dans les tissus fixés au formol.
• Pour l’immunofluorescence (IF/ICC), envisagez une perméabilisation au Triton X-100 ou au méthanol afin de permettre à l’anticorps d’accéder au réseau de microtubules.
• Validez la réactivité croisée dans les échantillons de souris ou de rat en les comparant à des lysats de cellules humaines, car il est indiqué que l’anticorps réagit avec les trois espèces.
• Utilisez des contrôles appropriés, par exemple un marquage conjoint de l’α-tubuline, afin de confirmer la localisation des microtubules dans les expériences d’imagerie.

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