Anticorps Monoclonal Lapin USP9X pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q93008

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de l'USP9X

• L'USP9X (Ubiquitine carboxyl-terminal hydrolase 9X), également connu sous le nom de FAF, FAM, hFAM, DFFRX, MRX99, est une grande enzyme déubiquitinase codée par le gène USP9X situé sur le chromosome X. Elle appartient à la famille des peptidases C19 des protéases spécifiques à l'ubiquitine.
• Agissant comme une protéase à thiol, l'USP9X hydrolyse spécifiquement les chaînes polyubiquitines avec une préférence pour les liaisons Lys-11, suivies des liaisons Lys-63, Lys-48 et Lys-6, retirant ainsi l'ubiquitine des protéines cibles et régulant le renouvellement des protéines. Références connexes : PMID:30914461
• L'USP9X est une composante essentielle de la cascade de signalisation TGF-beta/BMP, où elle déubiquitine le SMAD4 monoubiquitiné, s'opposant à la ligase E3 ubiquitine-protéine TRIM33 et favorisant la transduction du signal. Références connexes : PMID:19135894
• Lors de la mitose, l'USP9X régule l'alignement et la ségrégation des chromosomes en contrôlant la localisation de BIRC5/survivine aux centromères mitotiques, assurant ainsi une division cellulaire appropriée. Références connexes : PMID:16322459
• L'USP9X déubiquitine et stabilise plusieurs protéines impliquées dans la réparation de l'ADN (ALKBH3), la déméthylation de l'ARN (ALKBH5) et l'assemblage du complexe mTORC2 (RICTOR), soulignant son rôle dans le maintien de l'homéostasie cellulaire. Références connexes : PMID:25944111 PMID:37454738 PMID:33378666
• L'enzyme participe également à l'importation des peroxysomes en déubiquitinant PEX5, réinitialise l'horloge circadienne via la stabilisation de BMAL1 et inhibe la voie de signalisation Hippo par la déubiquitination d'AMOTL2. Références connexes : PMID:22371489 PMID:29626158 PMID:26598551 PMID:34404733
• Au niveau subcellulaire, l'USP9X se localise dans le cytosol, les cônes de croissance et l'axonème du cilium, ce qui est cohérent avec ses rôles dans le développement neuronal et la migration cellulaire.
• Largement exprimé dans les tissus embryonnaires et adultes, les mutations de l'USP9X sont associées au déficit intellectuel lié à l'X (MRX99, XLID99), soulignant son importance dans le neurodéveloppement.

Conseils Expérimentaux et Astuces Techniques

• L'immunogène correspond à la région N-terminale (aa 1-100) de l'USP9X humain ; l'anticorps peut reconnaître l'USP9X pleine longueur ainsi que tous les fragments N-terminaux. Tenez compte de cela lors de l'interprétation des bandes en Western blot.
• En raison du poids moléculaire élevé de l'USP9X (~290 kDa), utilisez des gels SDS-PAGE à faible pourcentage (par exemple, 6 %) et des temps de transfert humide prolongés (par exemple, une nuit à 4 °C) pour une résolution et un transfert optimaux en WB.
• Pour IHC-P et IF/ICC, les techniques standard de récupération d'antigène (tampon citrate ou EDTA médié par la chaleur) sont recommandées, mais les conditions de fixation doivent être validées pour le type d'échantillon spécifique.
• Dans ELISA, l'immunogène peptide synthétique peut servir de témoin positif ; cependant, la réactivité croisée avec l'USP9X de souris et de rat doit être vérifiée si vous utilisez des échantillons de rongeurs.

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