Anticorps polyclonal de lapin anti-UBE2K pour WB, ELISA - P61086

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de l'UBE2K

• UBE2K (enzyme de conjugaison de l'ubiquitine E2 K, également connue sous les noms HIP2 et E2-25K) est une enzyme E2 qui accepte l'ubiquitine du complexe E1 et catalyse sa fixation covalente aux protéines substrats, jouant ainsi un rôle central dans le système ubiquitine-protéasome.
• Elle catalyse la synthèse de chaînes de polyubiquitine liées par Lys-48, qui ciblent généralement les protéines pour leur dégradation par le protéasome. Cette enzyme assure la dégradation sélective des protéines à courte durée de vie et anormales, notamment celles impliquées dans la dégradation associée au réticulum endoplasmique (ERAD).
• UBE2K ubiquitine la huntingtine, la protéine impliquée dans la maladie de Huntington, et contribue à la formation de cellules spumeuses en favorisant la dégradation de p53, supprimant ainsi l'apoptose dans les macrophages chargés de lipides.
• Lors d'infections virales, UBE2K est détournée pour la dégradation de la chaîne lourde du CMH de classe I et la dégradation de RB1 dépendante de HPV E7, ce qui met en évidence son rôle dans l'évasion immunitaire et la transformation oncogénique.
• La protéine est principalement localisée dans le cytoplasme, ce qui concorde avec son rôle dans les événements de l'ubiquitination cytosolique.
• UBE2K subit des modifications post-traductionnelles, notamment une acétylation et une phosphorylation, qui peuvent réguler son activité ; l'épissage alternatif génère des isoformes supplémentaires.
• Elle est exprimée de manière ubiquitaire dans les tissus humains, avec une forte expression dans le cerveau, en particulier dans le cortex et le striatum, des régions touchées dans les maladies neurodégénératives.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène correspond à un peptide synthétique couvrant les acides aminés 1 à 100 de l'UBE2K humain et ciblant la région N-terminale. Une réactivité contre la protéine de pleine longueur (22 kDa) est attendue en Western blot.
• Pour le Western blot, titrez l'anticorps entre des dilutions de 1:500 et 1:2000 et optimisez les conditions en fonction de votre échantillon et de votre système de détection. Utilisez des témoins positifs appropriés (par exemple, un lysat de cellules HeLa) ainsi que des témoins négatifs.
• Cet anticorps est validé pour l'ELISA ; pour un ELISA indirect, déterminez empiriquement la concentration optimale de l'antigène de revêtement et la dilution de l'anticorps.
• Comme la réactivité croisée n'est confirmée que pour l'UBE2K humaine, validez l'anticorps dans d'autres espèces si nécessaire, car l'homologie de séquence peut permettre une réactivité croisée.
• Les anticorps polyclonaux peuvent présenter une variabilité d'un lot à l'autre ; incluez des standards de référence internes afin d'assurer la reproductibilité.

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