Anticorps monoclonal de lapin TriMethyl-Histone H4-K20 (P62805) pour WB, IHC-P, IF/ICC

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'histone H4

L'histone H4 est un composant central du nucléosome, l'unité répétitive fondamentale de la chromatine. Elle enveloppe et compacte l'ADN, limitant ainsi son accessibilité aux machineries cellulaires qui nécessitent l'ADN comme matrice. Par conséquent, H4 joue un rôle central dans la régulation de la transcription, la réparation de l'ADN, la réplication de l'ADN et la stabilité chromosomique. Références associées : UniProt:P62805

L'extrémité N-terminale de l'histone H4, y compris la lysine 20 (K20), est soumise à une vaste gamme de modifications post-traductionnelles — acétylation, méthylation, phosphorylation, et plus encore — qui constituent le "code histone". Ces modifications régulent dynamiquement la structure de la chromatine et l'expression des gènes. Références associées : PMID:12086618, PMID:17967882

Plus précisément, la triméthylation sur la lysine 20 (H4K20me3) est une marque épigénétique bien caractérisée principalement associée à l'hétérochromatine constitutive, contribuant au silence génique et au maintien de la stabilité du génome. Cette modification est catalysée par des méthyltransférases telles que SUV420H1 et SUV420H2. Références associées : PMID:12086618, PMID:15964846, PMID:17967882, PMID:32209475

Au niveau subcellulaire, l'histone H4 est principalement localisée dans le noyau et sur les chromosomes. Au cours de la spermatogenèse, l'histone H4 acétylée présente une rétention nucléaire accrue dans les spermatides au stade 11. Références associées : UniProt:P62805

Guide expérimental et conseils techniques

• Étant donné que cet anticorps reconnaît un épitope spécifique de la méthylation, assurez-vous que les tampons de blocage et de lavage maintiennent la stabilité du groupe méthyle. Du lait écrémé en poudre ou de la BSA peuvent être utilisés, mais évitez les conditions de démasquage agressives qui pourraient altérer la modification.
• Pour le Western blot, envisagez d'utiliser des histones extraites à l'acide ou des lysats enrichis en noyaux pour augmenter le signal des modifications d'histones, et faites migrer les échantillons sur un gel SDS-PAGE à pourcentage élevé (15% ou gradient) pour une résolution optimale de la protéine H4 de 11 kDa.
• En IHC-P, les méthodes standard de récupération antigénique (par exemple, tampon citrate pH 6,0) sont généralement compatibles ; cependant, validez sur des coupes de tissus connus pour exprimer les marques H4K20me3, comme les régions hétérochromatiques.
• Pour les applications ELISA ou dot blot, incluez des contrôles avec des peptides non méthylés et mono-/di-méthylés pour confirmer la spécificité pour la triméthylation.
• Ce format monoclonal recombinant de lapin offre une reproductibilité élevée pour les études à long terme ; validez les facteurs de dilution dans votre système d'échantillon pertinent.

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