Anticorps polyclonal de lapin anti-Histone H3 tri-méthylée (K9) - Q16695/P68431 | WB, ChIP, IHC, ELISA

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'Histone H3-K9 tri-méthylée

L'histone H3 est un composant central du nucléosome, enveloppant et compactant l'ADN en chromatine pour limiter son accessibilité. Cette compaction confère aux histones un rôle central dans la régulation de la transcription, la réparation de l'ADN, la réplication de l'ADN et la stabilité chromosomique. L'accessibilité de l'ADN est régulée dynamiquement par un ensemble complexe de modifications post-traductionnelles (le "code histone") et le remodelage des nucléosomes. Références associées : UniProt Q16695 / P68431

L'histone H3 humaine existe sous plusieurs variants, incluant le variant canonique dépendant de la réplication H3.1 (codé par plusieurs gènes tels que H3C1, H3C2, etc. ; UniProt P68431) et le variant spécifique du testicule H3.1t (gène H3-4 ; UniProt Q16695). Les deux variants partagent une queue N-terminale hautement conservée sujette à de nombreuses modifications post-traductionnelles. Références associées : UniProt Q16695 / P68431

La triméthylation de la lysine 9 (H3K9me3, correspondant à la position 10 dans la séquence complète UniProt) est une modification caractéristique fréquemment associée à la formation d'hétérochromatine constitutive, à la répression transcriptionnelle et au recrutement de la protéine HP1 (hétérochromatine protéine 1). Cette modification est documentée dans UniProt avec de nombreuses preuves expérimentales. Références associées : PMID:11242053, PMID:16185088, PMID:16267050, PMID:16457588, PMID:17194708

H3.1 et H3.1t se localisent toutes deux dans le noyau et sont associées aux chromosomes. Alors que H3.1 est exprimée de manière ubiquitaire, l'expression de H3.1t est restreinte aux cellules testiculaires. Références associées : UniProt Q16695 / P68431

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique contenant la K9 triméthylée ; pour le Western blot, envisagez d'utiliser des lysats cellulaires totaux ou des extraits enrichis en histones et validez la bande attendue à ~15 kDa.
• Pour l'immunoprécipitation de la chromatine (ChIP), concevez des amorces qPCR pour des loci connus enrichis en H3K9me3 (par exemple, les répétitions péricentromériques) comme contrôles positifs ; incluez une compétition avec un peptide non modifié pour vérifier la spécificité de l'anticorps.
• Pour l'immunohistochimie (IHC‑P) et l'immunofluorescence (IF/ICC), optimisez les conditions de fixation, de perméabilisation et de récupération antigénique pour votre échantillon ; l'utilisation de tissus témoins positifs et négatifs (par exemple, testicule vs. non-testicule) est recommandée.
• L'anticorps est prédit pour avoir une réactivité croisée avec un large éventail d'espèces au-delà de l'humain, de la souris et du rat ; une validation dans le système d'échantillon pertinent est donc conseillée.

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