Anticorps Polyclonal de Lapin TriMethyl-Histone H3-K64 (Q16695/P68431) (WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA)

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de l'Histone H3

L'histone H3 est un composant central du nucléosome, l'unité fondamentale et répétitive de la chromatine. Les nucléosomes enroulent et compactent l'ADN, régulant son accessibilité à la machinerie cellulaire nécessaire pour des processus tels que la transcription, la réparation de l'ADN, la réplication de l'ADN et le maintien de la stabilité chromosomique. Les histones jouent ainsi un rôle central dans l'organisation et la fonction du génome. L'accessibilité de l'ADN est contrôlée dynamiquement par un ensemble complexe de modifications post-traductionnelles (PTM) sur les histones, souvent appelées le code des histones, ainsi que par des activités de remodelage des nucléosomes.

Deux isoformes sont représentées par les numéros d'accès Swiss-Prot Q16695 et P68431. Q16695 (Histone H3.1t, également connue sous le nom de H3t ou H3.4) est une variante de l'histone H3 spécifique aux testicules, exprimée principalement dans les cellules testiculaires, où elle contribue probablement à la réorganisation de la chromatine lors de la spermatogenèse. P68431 (Histone H3.1) est une histone canonique, dépendante de la réplication, largement exprimée et déposée sur l'ADN nouvellement synthétisé pendant la phase S. Les deux isoformes partagent une homologie de séquence étendue et sont soumises à une multitude de PTM, notamment la méthylation, l'acétylation, la phosphorylation et d'autres, qui modulent la structure et la fonction de la chromatine.

La triméthylation de la lysine 64 (K64) est une marque épigénétique spécifique située dans la queue de l'histone H3, bien que ses rôles biologiques précis soient encore en cours d'élucidation. Comme d'autres événements de méthylation des histones, on pense qu'elle influence l'expression des gènes en servant de site d'ancrage pour les protéines effectrices ou en modifiant la compaction de la chromatine.

Références connexes : UniProt Q16695, UniProt P68431.

Guidance Expérimentale et Conseils Techniques

• L'immunogène utilisé est un peptide triméthylé synthétique correspondant à la région entourant la lysine 64 de l'histone H3 (basé sur NP_003520.1). Cette conception permet une reconnaissance spécifique de l'état triméthylé à ce résidu.
• Pour le Western blot (WB), envisagez d'utiliser des lysats cellulaires totaux provenant d'échantillons humains, de souris, de rat ou d'autres vertébrés. Le poids moléculaire prédit d'environ 15 kDa doit être confirmé dans des conditions réductrices et dénaturantes.
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P), des méthodes de récupération de l'antigène (par exemple, la récupération de l'épitope induite par la chaleur dans un tampon citrate) peuvent être nécessaires pour démasquer l'épitope. Validez la coloration sur des tissus de contrôle positifs et négatifs, en tenant compte de l'expression spécifique aux testicules de l'isoforme H3.1t.
• En immunofluorescence (IF/ICC), les conditions optimales de fixation et de perméabilisation doivent être déterminées empiriquement. La large réactivité croisée prédite rend cet anticorps adapté aux études comparatives multi-espèces.
• Pour ELISA, l'anticorps peut être utilisé pour détecter des peptides H3-K64 triméthylés ou des protéines recombinantes. Assurez-vous de bloquer correctement et de laver pour minimiser la liaison non spécifique.

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