Anticorps polyclonal de lapin anti-TriMéthyl-Histone H3-K56 (Q16695/P68431) pour WB, IF/ICC, ELISA, ChIP-seq

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'histone H3 (H3.1/H3.1t)

• L'histone H3 est un composant central du nucléosome, enroulant et compactant l'ADN en chromatine pour limiter l'accessibilité de l'ADN. Elle joue un rôle central dans la régulation de la transcription, la réparation de l'ADN, la réplication de l'ADN et la stabilité chromosomique.
• L'accessibilité de l'ADN est régie par un ensemble complexe de modifications post-traductionnelles (MPT) sur les histones, collectivement appelées code des histones. Ces MPT sont lues par des protéines effectrices qui assurent les changements d'état de la chromatine et les résultats de l'expression génique.
• La triméthylation de la lysine 56 (K56me3) est une MPT spécifique située dans le domaine globulaire de l'H3. Cette modification peut influencer les interactions histone-ADN au sein du nucléosome et est impliquée dans la réponse aux dommages de l'ADN et la dynamique de la chromatine pendant la réplication.
• L'histone canonique H3.1 est exprimée de manière ubiquitaire, tandis que le variant H3.1t (codé par H3-4/HIST3H3) présente une expression spécifique aux testicules.
• Les deux isoformes se localisent dans le noyau et s'associent aux chromosomes, conformément à leur rôle structurel dans l'organisation de la chromatine.

Références associées :

• Identification de H3K56me3 par spectrométrie de masse PMID:17194708
• Rôle de EHMT2 (G9a) dans la méthylation de K56 PMID:22387026
• Composition de la particule centrale du nucléosome et modifications des histones (revue) Entrée UniProt

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Envisagez d'utiliser un test de compétition peptidique avec des peptides K56 triméthylés et non modifiés pour confirmer la spécificité de l'anticorps pour la marque K56me3, en particulier lors de l'utilisation d'échantillons biologiques complexes.
• Pour le Western Blot, validez la bande observée au poids moléculaire attendu de 15 kDa en utilisant des extraits nucléaires des espèces étudiées, et incluez des contrôles de charge et des marqueurs de poids moléculaire appropriés.
• Dans les expériences de ChIP-seq, incluez une réaction témoin utilisant un peptide non modifié ou un échantillon bloqué par l'anticorps pour exclure tout enrichissement non spécifique. Une réactivité croisée sur une large gamme d'espèces est prédite en raison de la forte conservation de la séquence de l'histone H3, mais une validation expérimentale dans l'espèce cible est conseillée.
• Pour les applications IF/ICC, envisagez une co-coloration avec des marqueurs de la chromatine ou des sous-structures nucléaires spécifiques pour confirmer la localisation spatiale du signal.

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