Anticorps Monoclonal Lapin TriMethyl-Histone H3-K4 (Q16695/P68431) pour ChIP-Seq, CUT&Tag, WB

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de l'Histone H3

Les histones sont des protéines basiques hautement conservées qui servent de composants centraux des nucléosomes, les unités fondamentales de la chromatine. L'histone H3 est l'une des cinq principales protéines histones impliquées dans la structure de la chromatine dans les cellules eucaryotes. Avec H2A, H2B et H4, elle forme l'octamère d'histones autour duquel environ 147 paires de bases d'ADN sont enroulées, compactant le génome et régulant l'accessibilité à la machinerie transcriptionnelle.

La dynamique des nucléosomes, y compris les modifications post-traductionnelles (MPT) des queues d'histones, joue un rôle crucial dans la régulation épigénétique. L'histone H3 est soumise à de nombreuses modifications telles que la méthylation, l'acétylation, la phosphorylation, et plus encore, qui constituent collectivement le « code histone » régissant la structure de la chromatine et l'expression des gènes.

Parmi ces MPT, la triméthylation de la lysine 4 sur l'histone H3 (H3K4me3) est une marque de transcription active. Elle se trouve principalement au niveau des promoteurs des gènes activement transcrits et est impliquée dans le recrutement de complexes de remodelage de la chromatine et des facteurs de transcription. L'anticorps décrit ici reconnaît spécifiquement la forme triméthylée de H3K4. Cette modification est médiée par des méthyltransférases telles que les complexes MLL et est associée à l'activation des gènes. Références connexes : PMID:16267050 PMID:16457588 PMID:17194708

L'histone H3.1t (codée par le gène H3-4, numéro d'accès Q16695) est une variante spécifique du testicule de l'histone H3.1, exprimée dans les cellules testiculaires. L'histone H3.1 canonique (numéro d'accès P68431) est exprimée dans la plupart des tissus et est codée par plusieurs gènes. Les deux variantes partagent une grande similitude de séquence et sont des composants centraux du nucléosome.

La localisation subcellulaire est exclusivement nucléaire, associée aux chromosomes.

Guides Expérimentaux et Conseils Techniques

• Cet anticorps a été élevé contre un peptide synthétique correspondant à la lysine 4 triméthylée de l'histone H3 humaine. Pour des applications telles que ChIP-seq, CUT&Tag ou IF, envisagez d'inclure un témoin négatif utilisant un peptide non triméthylé ou un témoin isotypique pour confirmer la spécificité.
• L'anticorps est prédit pour avoir une large réactivité croisée en raison de la forte conservation de la queue N-terminale de H3 entre les espèces. Cependant, une validation dans le système expérimental pertinent est recommandée.
• Pour le western blot, une bande autour de 15 kDa correspondant à l'histone H3 devrait être détectée. Assurez-vous d'une extraction correcte des histones, particulièrement lors de l'analyse des états de méthylation.
• Dans les essais ChIP, le cisaillement optimal de la chromatine et le titrage de l'anticorps doivent être déterminés empiriquement.
• Pour les applications quantitatives comme l'ELISA ou le DB, envisagez d'utiliser une courbe standard avec des quantités connues de peptide triméthylé.
• L'anticorps peut être utilisé dans des essais multiplexés avec d'autres anticorps de modification d'histones pour étudier le code histone de manière combinatoire.

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