pAb de lapin anti-TRIM5 - Q9C035

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de TRIM5

• TRIM5, également connu sous le nom de RNF88 ou protéine 88 à doigt RING, appartient à la famille des protéines à motif tripartite (TRIM), caractérisées par des domaines RING, B-box et à enroulement hélicoïdal. Il agit comme une ubiquitine ligase E3 impliquée dans l’immunité innée antivirale.
• Agit comme un facteur de restriction spécifique de la capside, bloquant l’infection par des rétrovirus non adaptés à l’hôte (notamment N-MLV, EIAV, SIVmac, FIV et BIV) au début du cycle viral, après l’entrée du virus mais avant la transcription inverse. Sert également de récepteur de reconnaissance des motifs, activant la signalisation de l’immunité innée lors de sa liaison au réseau de capsides rétrovirales, déclenchant son activité de ligase E3, générant des chaînes de polyubiquitine liées en Lys-63 via le complexe UBE2V1-UBE2N, et conduisant finalement à l’induction de gènes répondant à NF-kB et aux MAPK. Références associées : PMID:17156811
• Régule l’autophagie en libérant BECN1 de ses inhibiteurs BCL2 et TAB2, et agit comme un récepteur d’autophagie sélective ciblant la protéine de capside p24 du VIH-1 pour sa dégradation autophagique. Références associées : PMID:25127057
• Se localise à la fois dans le cytoplasme et dans le noyau, ce qui lui permet d’intercepter les capsides virales entrantes dans le cytoplasme et de moduler éventuellement l’expression des gènes de l’hôte dans le noyau.
• Présente des modifications post-traductionnelles et des caractéristiques structurales essentielles : acétylation, phosphorylation, ainsi que des domaines à doigt de zinc RING et B-box liant le zinc, indispensables à son activité de ligase E3 et à sa fonction antivirale.
• Présente un épissage alternatif produisant des isoformes telles que TRIM5alpha (la forme antivirale pleine longueur) et d’autres isoformes dotées de spécificités antivirales et de profils d’expression distincts.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène est un peptide synthétique couvrant les acides aminés 100 à 200 du TRIM5 humain (NP_149083.2). En raison de sa nature polyclonale, l’anticorps peut reconnaître plusieurs variants et isoformes de TRIM5 ; confirmez sa spécificité dans l’espèce et le type cellulaire ciblés.
• Pour le Western blot, une bande prédominante d’environ 56 kDa correspondant à TRIM5alpha est attendue dans les lysats humains, murins et de rat. Optimisez la préparation des échantillons et les contrôles de chargement afin de la distinguer d’autres membres de la famille TRIM présentant des poids moléculaires similaires.
• En ELISA, l’anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection. Effectuez une titration soigneuse et validez la linéarité et la sensibilité avec une protéine TRIM5 recombinante ou des lysats cellulaires exprimant la cible.

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