Anticorps monoclonal lapin Symmetric DiMéthyl-Histone H4-R3 (P62805) pour la recherche en épigénétique

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'Histone H4

L'Histone H4 est l'une des histones centrales qui constituent le nucléosome eucaryote, autour duquel l'ADN s'enroule pour former la chromatine. Elle joue un rôle fondamental dans la régulation de la transcription, la réparation de l'ADN, la réplication de l'ADN et la stabilité chromosomique. La modification post-traductionnelle dynamique des histones, souvent appelée « code histone », régit l'accessibilité de l'ADN aux protéines régulatrices et est au cœur du contrôle épigénétique. Références associées : UniProt P62805

L'Histone H4 est principalement localisée dans le noyau et s'associe aux chromosomes. Au cours de la spermatogenèse, l'H4 acetylé est localisé dans le noyau des spermatides à l'étape 11. Références associées : UniProt P62805

L'Histone H4 subit de nombreuses modifications post-traductionnelles, notamment l'acétylation, la méthylation, la phosphorylation et d'autres. La diméthylation symétrique au niveau de l'Arg3 (SDMA-H4R3) est catalysée par les protéines arginine méthyltransférases PRMT5 et PRMT7, et elle est impliquée dans la régulation transcriptionnelle. Références associées : UniProt P62805

Les autres modifications comprennent la diméthylation asymétrique et la citrullination au niveau de l'Arg3, l'acétylation au niveau de plusieurs résidus lysine (par exemple K5, K8, K12, K16), et la phosphorylation au niveau de résidus sérine et tyrosine spécifiques. Ces marques combinatoires définissent des états chromatiniens distincts. Références associées : PMID:11387442 PMID:11448779 PMID:15345777 PMID:16567635 PMID:21724829 PMID:15592455 PMID:20068231

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique couvrant les 1-100 acides aminés N-terminaux de l'Histone H4 humaine, qui inclut le résidu Arg3 symétriquement diméthylé. Lors de la conception de vos expériences, assurez-vous que la spécificité de l'anticorps pour cette modification est vérifiée à l'aide d'une compétition peptidique appropriée ou de contrôles mutants.
• Pour le Western Blot (WB), nous vous conseillons d'utiliser des extraits nucléaires de lignées cellulaires humaines ou de rat. Le poids moléculaire prédit est d'environ 11 kDa. Validez la taille de la bande et la spécificité dans votre système d'échantillon.
• Les applications d'immunofluorescence (IF/ICC) peuvent nécessiter des protocoles standard de coloration nucléaire. Une co-coloration avec des colorants ADN comme le DAPI peut aider à confirmer la localisation nucléaire.
• Le Dot Blot (DB) et l'ELISA peuvent être utilisés pour quantifier les niveaux de DiMéthyl-H4R3 symétrique dans des préparations d'histones ou des lysats cellulaires. Ces tests sont utiles pour le criblage à haut débit d'inhibiteurs ou d'activateurs de la méthylation.

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