Anticorps polyclonal de lapin anti-Histone H3-R8 DiMéthylée Symétrique (Q16695/P68431) pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA, ChIP-seq

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'Histone H3.1t / Histone H3.1

Les variantes de l'histone H3 (y compris H3.1t codée par H3-4/HIST3H3 et H3.1 codée par plusieurs clusters de gènes tels que H3C1-H3C12) sont des composants centraux du nucléosome. Les nucléosomes enroulent et compactent l'ADN en chromatine, limitant l'accessibilité de l'ADN et jouant un rôle central dans la régulation de la transcription, la réparation de l'ADN, la réplication de l'ADN et la stabilité chromosomique.

Références connexes : UniProt P68431

• Ces histones sont soumises à un ensemble complexe de modifications post-traductionnelles (PTM), collectivement appelées le code des histones, qui régulent la dynamique de la chromatine et l'expression des gènes. Parmi celles-ci, la diméthylation symétrique de l'arginine en position 8 (R8) de l'histone H3 mature (correspondant à Arg9 dans la séquence UniProt) est catalysée par la protéine arginine méthyltransférase 5 (PRMT5). Cette modification est associée à la répression transcriptionnelle et à la formation d'hétérochromatine.

Références connexes : UniProt Q16695

• L'histone H3.1t (UniProt Q16695) est une variante spécifique des testicules exprimée principalement dans les cellules testiculaires, tandis que H3.1 (UniProt P68431) représente les formes somatiques canoniques.
• Localisation subcellulaire : Les deux variantes sont localisées dans le noyau et sur les chromosomes.

Conseils expérimentaux et techniques

• Western Blot (WB) : Attendez-vous à une bande à environ 15 kDa. Utilisez des témoins positifs et négatifs appropriés (par exemple, cellules non traitées vs traitées avec un inhibiteur de PRMT5) pour confirmer la spécificité de la diméthylation symétrique. Envisagez des essais de compétition par peptides pour valider la liaison de l'anticorps à l'épitope R8me2s.
• Immunohistochimie (IHC-P) et Immunofluorescence (IF/ICC) : Optimisez les étapes de fixation et de perméabilisation, car l'accessibilité de l'épitope peut varier. Puisque l'histone H3 est nucléaire, assurez-vous d'un motif de coloration nucléaire et comparez avec la coloration de contre-échantillonnage de l'histone H3 totale ou du DAPI.
• ELISA : Cet anticorps peut être utilisé pour des ELISA directs ou indirects afin de quantifier les niveaux de diméthylation symétrique. Effectuez un titrage de la concentration d'anticorps et incluez des agents de blocage appropriés.
• ChIP-seq : En raison de l'abondance élevée de l'histone H3, optimisez le réticulation (crosslinking) et le cisaillement de la chromatine. Utilisez une quantité minimale de matériel et validez l'efficacité du ChIP avec des locus génomiques positifs et négatifs (par exemple, régions hétéchromatiques vs euchromatiques).
• Conseil général : Incluez toujours un témoin de peptide non modifié pour distinguer le signal spécifique à la modification.

CamelBio : Votre passerelle d'approvisionnement tout-en-un

CamelBio offre aux fabricants de diagnostics, aux laboratoires et aux instituts de recherche une voie d'approvisionnement rationalisée pour les matières premières de diagnostic in vitro (DIV), du concept à la clinique. Cet anticorps anti-histone H3-R8 diméthylée symétrique, ciblant une marque épigénétique critique, fait partie de notre portefeuille complet d'anticorps méthylés et de réactifs de modification d'histones. Au-delà des anticorps individuels, nous fournissons des paires d'anticorps validées, des anticorps monoclonaux et polyclonaux optimisés, des réactifs auxiliaires en vrac, et nous assistons dans l'approvisionnement de matières premières pour cibles rares afin d'accélérer votre développement de tests DIV et vos programmes de recherche. Partenaires avec nous pour simplifier votre chaîne d'approvisionnement et faire avancer vos projets de diagnostic.