Anticorps polyclonal de lapin anti-Histone H3-R2 diméthylée symétrique (Q16695/P68431) pour WB, IHC, IF, ELISA, ChIP-seq

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'Histone H3

L'histone H3 est l'une des protéines histones centrales qui, avec H2A, H2B et H4, forme la particule centrale du nucléosome. Les nucléosomes enveloppent et compactent l'ADN en chromatine, jouant un rôle central dans la régulation de la transcription, la réparation de l'ADN, la réplication de l'ADN et la stabilité chromosomique. Références associées : UniProt Q16695, UniProt P68431

L'histone H3.1 (codée par de multiples gènes incluant H3C1, H3C2, etc.) et H3.1t (codée par H3-4) sont toutes deux exprimées dans les cellules humaines, H3.1t étant principalement trouvée dans les cellules testiculaires. Références associées : UniProt Q16695

Les histones subissent une vaste gamme de modifications post-traductionnelles (MPT), incluant l'acétylation, la méthylation, la phosphorylation, la citrullination, et plus encore, collectivement connues sous le nom de "code histone". Ces modifications régulent la structure de la chromatine et l'expression des gènes. Parmi celles-ci, la diméthylation symétrique des résidus arginine est catalysée par des protéines arginine méthyltransférases telles que PRMT5. Par exemple, la diméthylation symétrique au niveau de l'arginine 9 de l'histone H3 (H3R9me2s) a été rapportée. Cet anticorps reconnaît spécifiquement l'arginine 2 diméthylée symétrique (H3R2me2s), une modification qui peut jouer un rôle dans la régulation épigénétique. Références associées : UniProt Q16695

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique diméthylé symétrique autour de R2, garantissant une haute spécificité pour la modification H3R2me2s. Lors de l'exécution d'un Western blot, des extraits nucléaires enrichis en histones ou des histones extraites à l'acide peuvent améliorer la détection.
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P) et l'immunofluorescence (IF/ICC), les conditions de démasquage antigénique et de perméabilisation doivent être optimisées pour chaque type de tissu ou de cellule.
• Dans les expériences ChIP-seq, envisagez d'inclure des réactions de contrôle telles que l'ADN input, un contrôle IgG et éventuellement une compétition par peptide pour confirmer la spécificité de liaison. Des contrôles "spike-in" peuvent être utiles pour la normalisation quantitative.
• Les approches basées sur l'ELISA peuvent être utilisées pour la détection quantitative des niveaux de H3R2me2s dans des lysats cellulaires ou des préparations d'histones purifiées ; assurez une quantité de protéine constante et envisagez d'utiliser un anticorps pan-H3 pour la normalisation.
• La réactivité croisée est rapportée pour l'humain, la souris, le rat et d'autres espèces (large gamme prédite). Cependant, une validation dans votre système d'échantillon spécifique est recommandée.

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