Anticorps monoclonal de lapin contre Histone H3-R17 diméthylé symétrique (Q16695/P68431) pour WB, DB, IHC-P, ELISA

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'Histone H3

L'Histone H3 est un composant essentiel du nucléosome, qui enroule et compacte l'ADN pour former la chromatine. Cette compaction limite l'accessibilité de l'ADN pour la machinerie cellulaire et joue un rôle central dans la régulation de la transcription, la réparation de l'ADN, la réplication de l'ADN et la stabilité chromosomique. L'accessibilité de l'ADN est régulée dynamiquement par les modifications post-traductionnelles (PTM) des histones, collectivement désignées sous le nom de « code histone », associé au remodelage des nucléosomes. Références associées : PMID:19608861, PMID:17194708

L'Histone H3 se localise dans le noyau et est associé aux chromosomes. Deux isoformes humaines principales sont représentées par les entrées SWISS Q16695 (Histone H3.1t, spécifique du testicule) et P68431 (Histone H3.1, exprimé de manière ubiquitaire). Alors que H3.1t est majoritairement exprimé dans les cellules testiculaires, l'Histone H3.1 canonique est présent dans la plupart des tissus, soulignant la régulation spécifique des isoformes sur les fonctions de la chromatine. Références associées : Spécificité tissique UniProt Q16695

La méthylation des arginines des histones, y compris la diméthylation symétrique, est une PTM critique. L'enzyme PRMT5 catalyse la diméthylation symétrique des résidus arginine, comme le site bien caractérisé R9, influençant la régulation transcriptionnelle et l'organisation de la chromatine. La diméthylation symétrique au niveau du résidu R17 de l'Histone H3, cible de cet anticorps, représente une modification apparentée au sein du paysage de méthylation des histones. Bien que les fonctions spécifiques de R17 diméthylé symétrique soient moins bien établies, il participe probablement à l'activation ou la répression génique en fonction du contexte génomique. Références associées : PMID:16267050, PMID:17194708

De nombreuses autres modifications sont présentes sur H3 : acétylation, phosphorylation, citrullination et ADP-ribosylation, chacune associée à des machineries enzymatiques dédiées et des effets fonctionnels distincts. Cet anticorps constitue un outil pour étudier le rôle précis de R17 diméthylé symétrique dans le code histone complexe.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Confirmez la spécificité de l'anticorps par des tests de compétition peptidique ; prévoyez d'incuber l'anticorps à la fois avec le peptide R17 diméthylé symétrique et son homologue non modifié pour valider la liaison spécifique à la modification.
• Pour le Western Blot, enrichissez les fractions de protéines nucléaires pour améliorer le signal et vérifiez la bande d'environ 15 kDa attendue dans les lysats cellulaires appropriés (par ex. HeLa, tissu testiculaire pour l'isoforme H3.1t).
• Pour les applications en IHC-P, optimisez la récupération d'antigène (par ex. tampon citrate pH 6,0 ou EDTA pH 9,0) et incluez des contrôles négatifs (isotype IgG de lapin) pour garantir la spécificité de la coloration.
• La détection par ELISA peut être réalisée en utilisant des peptides modifiés et non modifiés comme antigènes de revêtement ; validez la linéarité et la sensibilité dans la gamme de concentration appropriée.
• La réactivité croisée est prédite sur un large spectre d'espèces ; validez systématiquement dans le système d'échantillon spécifique que vous étudiez pour garantir la reconnaissance attendue de l'Histone H3-R17 endogène diméthylé symétrique.

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