pAb lapin anti-SRSF10 pour WB et ELISA - O75494

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de SRSF10

• SRSF10, également appelée SRp38, SRrp40 et FUSIP1, est un facteur d'épissage riche en sérine/arginine appartenant à la famille des protéines SR. Elle joue un double rôle dans l'épissage constitutif et alternatif des pré-ARNm.
• Sous sa forme déphosphorylée, SRSF10 agit comme un répresseur général de l'épissage des pré-ARNm en interférant avec la reconnaissance du site d'épissage 5' de l'U1 snRNP par SNRNP70 ; cette activité est essentielle pour la répression de l'épissage pendant la phase M et après un choc thermique.
  Références associées :
  PMID:11684676 PMID:12419250 PMID:14765198
• SRSF10 favorise spécifiquement l'excision d'exons lors de l'épissage alternatif ; son interaction avec YTHDC1, qui reconnaît les ARNs contenant de la m6A, empêche SRSF10 de se lier près des sites m6A et inhibe donc l'excision d'exons.
  Références associées :
  PMID:26876937
• L'épissage alternatif de SRSF10 génère des isoformes aux fonctions régulatrices distinctes ; l'isoforme 1 agit comme un régulateur positif tandis que l'isoforme 3 agit comme un régulateur négatif de l'épissage alternatif neuronal.
  Références associées :
  PMID:12419250
• Au niveau sous-cellulaire, SRSF10 est localisée dans les speckles nucléaires — des structures dynamiques dédiées au traitement des pré-ARNm — ainsi que dans le cytoplasme, ce qui est cohérent avec son rôle de navette dans le métabolisme des ARNm.
• La protéine est largement exprimée dans tous les tissus et phosphorylée dans des conditions normales ; la déphosphorylation active sa fonction de répresseur, ce qui souligne l'importance du contrôle post-traductionnel. (Mots-clés : Phosphoprotéine)
• Les mots-clés UniProt pour SRSF10 sont : Épissage alternatif, Traitement des ARNm, Épissage des ARNm, Noyau, Cytoplasme, Phosphoprotéine, Liaison à l'ARN.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène utilisé pour cet anticorps polyclonal de lapin est un peptide synthétique couvrant les résidus 163-262 de la SRSF10 humaine. Nous recommandons d'utiliser la compétition par peptide bloquant pour confirmer la spécificité dans vos tests.
• Pour le Western blot, commencez par une gamme de dilution de 1:500–1:2000 et validez dans des lysats de lignées cellulaires humaines, murines ou de rat exprimant SRSF10. Le poids moléculaire prédit est d'environ 31 kDa ; assurez-vous d'utiliser un pourcentage de gel adapté pour la résolution.
• Pour l'ELISA, optimisez les dilutions de l'antigène de revêtement et de l'anticorps selon les protocoles standards. L'anticorps peut détecter à la fois les formes phosphorylées et non phosphorylées ; ajoutez des inhibiteurs de phosphatases dans les tampons de lyse si vous étudiez des activités dépendantes de la phosphorylation.
• La fonction de SRSF10 étant étroitement liée aux réponses au stress, les conditions expérimentales (par exemple choc thermique, synchronisation du cycle cellulaire) peuvent influencer significativement son abondance et son état de phosphorylation.

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