Anticorps Monoclonal Lapin Smad5 pour WB, IP, ELISA - Q99717

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de Smad5

• SMAD5 (Mothers against decapentaplegic homolog 5), également connu sous le nom de JV5-1 ou MADH5, est un membre de la famille des facteurs de transcription SMAD qui transduisent les signaux des ligands de la superfamille TGF‑β.
• Lors d'une stimulation par la protéine morphogénétique osseuse (BMP), SMAD5 est phosphorylé par les récepteurs BMP de type I, favorisant son association avec SMAD4. Le complexe résultant se transloque dans le noyau et se lie aux éléments de liaison Smad (SBE) pour réguler l'expression des gènes. Références connexes : PMID:9442019 PMID:33510867
• SMAD5 est essentiel pour le développement embryonnaire, la différenciation cellulaire, l'angiogenèse et l'homéostasie tissulaire. Références connexes : PMID:12064918 PMID:16516194
• Dans son état non phosphorylé, SMAD5 exerce un rôle cytoplasmique dans le métabolisme énergétique en améliorant la respiration mitochondriale et la glycolyse par une interaction avec l'hexokinase 1 (HK1). Références connexes : PMID:28675158
• Les études de localisation subcellulaire révèlent la présence de SMAD5 dans le cytoplasme, le noyau et la mitochondrie, reflétant ses diverses fonctions de signalisation et métaboliques.
• SMAD5 est exprimé de manière ubiquitaire dans les tissus humains.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la phosphorylation et l'acétylation ; il contient également un domaine de liaison au zinc caractéristique des protéines SMAD.

Conseils Expérimentaux et Astuces Techniques

• L'immunogène était un peptide synthétique correspondant aux acides aminés 200–300 du SMAD5 humain. L'anticorps monoclonal lapin résultant est censé reconnaître la protéine SMAD5 totale ; il peut ne pas distinguer les formes phosphorylées et non phosphorylées, sauf si l'épitope phosphorylé se trouve dans cette région.
• Pour le Western blot, une bande d'environ 52 kDa est attendue. Envisagez de traiter les cellules avec des ligands BMP (par exemple, BMP2/BMP4) pour visualiser les décalages du SMAD5 phosphorylé ou pour vérifier l'activation de la voie.
• Cet anticorps convient à l'immunoprécipitation du SMAD5 endogène à partir de lysats humains et de souris ; nous recommandons d'optimiser les conditions de lyse et de lavage pour les études de co-immunoprécipitation.
• Dans ELISA, l'anticorps peut être utilisé pour la détection du SMAD5 dans des formats ELISA basés sur des peptides ou en sandwich. Validez avec la protéine SMAD5 recombinante ou des lysats cellulaires.
• Comme pour tout anticorps, validez la spécificité dans votre système expérimental en utilisant des témoins positifs (par exemple, HeLa, HEK293 traités au BMP) et négatifs (par exemple, knockdown par ARNi) appropriés.

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